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COMPARACIÓN DE 3 MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE DNA A PARTIR DE CÉLULAS CERVICALES PARA LA AMPLIFICACIÓN DE UN FRAGMENTO DEL GEN Β-GLOBINA HUMANA POR PCR
(2020) Brenda Gisela Martinez Oliva; Ricardo Enrique Grados Torrez
En este trabajo se compararon 3 métodos de extracción de DNA: Fenol-cloroformo-alcohol isoamílico, Congelación/descongelación y Column ReliaPrep Blood gDNA Miniprep System. Para la extracción de DNA se emplearon muestras concentradas y diluidas (1/10) de células cervicales obtenidas por barrido cervical de mujeres proce- dentes de Cochabamba – Bolivia, utilizando como indicador de calidad de extracción de DNA a la amplificación por PCR del fragmento de 268 pb correspondiente a una región del gen β-globina. El análisis de la secuencia de cebadores empleados en PCR (GH20 forward y PC04 reverse) reveló que GH20(F) tiene la capacidad de dimerizar con una sola conformación, mientras que PC04(R) podría dimerizar con 5 conformaciones diferentes, sin embargo, se recomienda el uso de estos cebadores puesto que el ∆G de todas estos dímeros no representa una energía favorable, permitiendo una correcta amplificación. El presente artículo reporta la extracción exitosa de DNA a partir de muestras diluidas y concentradas de células cervicales empleando el método de congelación/descongelación y el método con Columna Relia - Prep. Sin embargo, con el método de fenol-cloroformo-alcohol isoamílico no se obtuvieron resultados de extracción de DNA.Fecha de recepción: 23/04/2020 ¦¦ Fecha de aprobación: 24/07/2020
Comparación del algoritmo nuevo con el algoritmo convencional para diagnóstico de VIH en Bolivia
(Universidad Autónoma del Estado de México, 2018) Brenda Gisela Martinez Oliva; Karen Jimena Montaño-Valenzuela; Patricia Rodriguez-Herbas; Amilcar Alejandr Flores-León; Ricardo Enrique Grados-Torrez
"En Bolivia, el algoritmo diagnóstico convencional para VIH utiliza como prueba confirmatoria el Western blot; debido a dificultades con el costo, tiempo y centralización del diagnóstico confirmatorio, el Programa Nacional ITS/VIH/SIDA-HV propuso un algoritmo nuevo que utiliza solo dos pruebas rápidas y ELISA Ag/Ac. Sesenta muestras de suero fueron procesadas con ambos algoritmos y se determinó el resultado verdadero de las muestras de acuerdo con ambos algoritmos y la carga viral. La sensibilidad, especificidad, valores predictivos, índice Kappa . chi-cuadrado de Pearson fueron calculados. El algoritmo convencional reportó: sensibilidad 96,3%, especificidad 100%, valor predictivo positivo 100% y valor predictivo negativo 97% el algoritmo nuevo presentó sensibilidad, especificidad, valores predictivos positivo y negativo del 100%. El índice Kappa fue 0,966 y chi-cuadrado de Pearson 56,078 con .<0,01; es así que el grado de concordancia entre ambos algoritmos es “muy bueno” y estadísticamente significativo. Aunque el número de muestras procesadas en este estudio fue reducido, el algoritmo nuevo parece ser mejor que el convencional debido a que acorta el tiempo de detección de VIH y reporta resultados iguales a la carga viral."
Crispr, una herramienta para editar genomas
(2020) Brenda Gisela Martinez Oliva
El artículo se centra en la utilización de la nueva herramienta, CRISPR (repeticiones palindrómicas cortas agrupadas a intervalos regulares), la cual permite editar los genomas de los seres vivos de manera más precisa que otras técnicas; a lo largo del artículo se mencionan trabajos relacionados con la detención de la angiogénesis, cáncer, Sarcoma de Kaposi en inmunodeficiencias, Parkinson, regeneración y modificación genética en humanos, todas estas investigaciones tiene en común la utilización de la herramienta CRISPR. También se comenta las complicaciones éticas que conlleva utilizar esta tecnología en el ADN de células embrionarias humanas, que según diferentes criterios, podrían llevar a generar seres humanos “mejorados”, es decir no solo sin susceptibilidad a enfermedades degenerativas o incurables, sino también modificados en aspectos físicos que no necesariamente estarían ligados a alguna patología.
Función biológica de AMPK- β2 en músculo esquelético y su dinámica estructural después de la activación por SC4
(2022) Dayana Pamela Dayana Pamela; Brenda Gisela Martinez Oliva; Ricardo Enrique Grados-Torrez
Introducción: La Proteína Quinasa Activada por AMP (AMPK), es una enzima monitora y reguladora central del estado energético celular, por tanto, es responsable de la respuesta celular al suministro y demanda de energía. El AMP actúa como activador en condiciones de déficit energético, mientras que el ATP la inactiva cuando las condiciones energéticas son más favorables. Debido a su función central en el metabolismo, la AMPK surge como un blanco proteico prometedor para el tratamiento de diferentes enfermedades como la Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2), Síndrome Metabólico (SM), Cáncer, entre otros. Existen múltiples isoformas de AMPK que se regulan y expresan diferencialmente en todo el organismo. La isoforma AMPK–β2 se expresa casi exclusivamente en músculo esquelético y dado que este es el órgano primario para el almacenamiento y eliminación de Glucosa, AMPK–β2 puede dirigir su homeostasis por una ruta independiente a la Insulina. La molécula activadora SC4 tiene una gran selectividad por AMPK–β2 y debido a su función biológica, podría servir como modelo farmacológico para coadyuvar el tratamiento de enfermedades metabólicas. Objetivo: Análisis de la dinámica molecular de activación de la AMPK–β2. Metodología: En el presente estudio, se emplean herramientas bioinformáticas como Chimera 1.15 y Phyton Molecular Viewer. Resultados: El análisis in silico permitió comprender varios aspectos estructurales relacionados con la acción de SC4 sobre la estructura trimérica de la AMPK, los aminoácidos con los que interacciona y cómo su estructura química le otorga gran selectividad. También fue útil para en un futuro, ampliar los criterios de extracción, identificación y/o diseño de compuestos activos a partir de fuentes naturales, con propiedades funcionales similares o aún mejores a SC4, para así poder emplearlos con un enfoque terapéutico que beneficie a nuestra población.
INHIBIDORES DE PUNTOS DE CONTROL EN EL CÁNCER DE MAMA
(2020) Brenda Gisela Martinez Oliva
En este trabajo se realiza un análisis de los resultados de ensayos clínicos que utilizan inhibidores de puntos de control para el tratamiento del cáncer de mama; los inhibidores de puntos de control son anticuerpos monoclonales que actúan en puntos específicos de control del sistema inmune, entre ellos tenemos a Ipilimumab contra CTLA-4, Atezolizumab con afinidad a PDL-1, Nivolumab y Pembrolizumab se unen a PD-1. Este tipo de terapia se denomina inmunoterapia, ha demostrado ser efectiva en diferentes tipos de cáncer, no obstante, aún están en proceso los ensayos clínicos que evalúan la seguridad y efecto antitumoral en el cáncer de mama. Existen muchas variables que afectan la eficacia de este tipo de terapia, entre ellas tenemos: la respuesta del sistema inmune, el tipo de tumor y estadio, factores genéticos y ambientales, por lo que es imprescindible estudiar estos factores y agruparlos en perfiles para poder predecir el resultado de un tratamiento para cada individuo. Los resultados actuales demuestran eficacia en la reducción del tumor, actividad citotóxica contra células tumorales, sin embargo, se exhiben efectos adversos y aún la duración de la respuesta es un reto a ser superado.Fecha de recepción: 10/08/2020 ¦¦ Fecha de aprobación: 18/12/2020
Orbis Tertius UPAL
(2023) Nilda Arroyo Villarroel; Katherine Gutiérrez Alba; Noelia Torrico Montaño; Brenda Gisela Martinez Oliva
El artículo presenta los resultados de un estudio exploratorio sobre las propiedades terapéuticas de la Mentha piperita para tratar problemas cutáneos como acné leve y grave, piel reseca, piel grasa y machas de sol en un grupo de individuos de 20 a 24 años de edad. En primera instancia se determinaron los metabolitos de las hojas de Mentha piperita proveniente de Cochabamba y posteriormente se elaboraron 2 productos fitoterápicos (jaboncillo e hidrolato), estos fueron aplicados en la piel de los rostros de los participantes, los cuales fueron separados previamente en 3 grupos, el grupo 1 conformado por 5 voluntarios utilizó el hidrolato, el grupo 2 constituido por 7 participantes empleó el jaboncillo, el grupo 3 formado por 2 personas utilizó ambos productos con intervalo de un mes de descanso. Todos los grupos emplearon los productos durante 2 meses y se realizaron controles semanales. En los resultados se observó que el 100% de los participantes mostraron cambios positivos en el rostro como aumento de la suavidad de la piel, frescura y mejoría en la eliminación de acné leve y severo. Utilizando el Test de McNemar para la variable suavidad se obtuvo p=0.0047 < α=0.95; para las variables frescura y eliminación de acné se obtuvo p=0.0253 < α=0.95, lo que indica que los cambios son producto del tratamiento. Las reacciones adversas reportadas en el uso del ja- boncillo fueron resequedad y ardor, no se reportaron reacciones adversas en el grupo de voluntarios que utilizó hidrolato. En el grupo de participantes de este estudio se evidenció que los productos fitoterápicos a base de menta parecen tener efectos beneficiosos para tratar problemas cutáneos importantes sin producir efectos adversos graves o irreversibles. Fecha de recepción: 24/03/22.Fecha de evaluación: 17/08/22.Fecha de aprobación: 20/12/22.
PRODUCTOS FITOTERÁPICOS A BASE DE MENTHA PIPERITA CON EFECTO TERAPÉUTICO PARA PROBLEMAS CUTÁNEOS
(2022) Nilda Arroyo Villarroel; Katherine Gutiérrez Alba; Noelia Torrico Montaño; Brenda Gisela Martinez Oliva
El artículo presenta los resultados de un estudio exploratorio sobre las propiedades terapéuticas de la Mentha piperita para tratar problemas cutáneos como acné leve y grave, piel reseca, piel grasa y machas de sol en un grupo de individuos de 20 a 24 años de edad. En primera instancia se determinaron los metabolitos de las hojas de Mentha piperita proveniente de Cochabamba y posteriormente se elaboraron 2 productos fitoterápicos (jaboncillo e hidrolato), estos fueron aplicados en la piel de los rostros de los participantes, los cuales fueron separados previamente en 3 grupos, el grupo 1 conformado por 5 voluntarios utilizó el hidrolato, el grupo 2 constituido por 7 participantes empleó el jaboncillo, el grupo 3 formado por 2 personas utilizó ambos productos con intervalo de un mes de descanso. Todos los grupos emplearon los productos durante 2 meses y se realizaron controles semanales. En los resultados se observó que el 100% de los participantes mostraron cambios positivos en el rostro como aumento de la suavidad de la piel, frescura y mejoría en la eliminación de acné leve y severo. Utilizando el Test de McNemar para la variable suavidad se obtuvo p=0.0047 < α=0.95; para las variables frescura y eliminación de acné se obtuvo p=0.0253 < α=0.95, lo que indica que los cambios son producto del tratamiento. Las reacciones adversas reportadas en el uso del ja- boncillo fueron resequedad y ardor, no se reportaron reacciones adversas en el grupo de voluntarios que utilizó hidrolato. En el grupo de participantes de este estudio se evidenció que los productos fitoterápicos a base de menta parecen tener efectos beneficiosos para tratar problemas cutáneos importantes sin producir efectos adversos graves o irreversibles. Fecha de recepción: 24/03/22.Fecha de evaluación: 17/08/22.Fecha de aprobación: 20/12/22.
PROTECCIÓN HUMORAL CONTRA CLOSTRIDIUM TETANI EN PACIENTES VACUNADOS CON TOXOIDE TETÁNICO EN EL DEPARTAMENTO DE COCHABAMBA
(2024) María Elena López Aguayo; Norah Parihuancollo Vaca; Enrique Grados Torrez; Brenda Gisela Martinez Oliva; Gabrielly Reis Brito de Moraes; Yhesica Nathaly Mamani Alanoca
La incidencia del tétanos se relaciona con el estado de inmunización de la población, en Bolivia, según los últimos datos de la Organización Mundial de la Salud (OMS) publicados en el año 2020, se reportaron 31 muertes causadas por tétanos, lo que representa el 0,04% de todas las muertes en el país. La tasa de mortalidad por edad es de 0,23 por cada 100.000 personas. En el contexto mundial, Bolivia ocupa el puesto número 64 en términos de mortalidad por tétanos, por estas razones evaluamos, en pacientes cochabambinos que recibieron la vacunación contra tétanos en la infancia y/o adultez, que sean mayores de edad, determinamos el nivel de protección humoral y comprobamos si existe o no un título aceptable de anticuerpos contra el Clostridium tetani que les confiera protección contra esta enfermedad, además, identificamos el requerimiento de dosis de refuerzo. Objetivo: evaluar el nivel de anticuerpos IgG contra toxoide tetánico en población cochabambina que recibió la vacuna contra Clostridium tetani en la infancia y/o adultez. Materiales y métodos: se determinó el nivel de Inmunoglobulina G contra Toxoide tetánico en 385 pacientes mediante ensayo de inmunoadsorción ligado a enzima (ELISA), utilizando muestras de suero de pacientes cochabambinos que asistieron al laboratorio clínico MAXI LAB, los cuales respondieron un cuestionario previo para evaluar su inclusión al estudio. Se utilizó un diseño transversal que incluyó a pacientes mayores de 18 años de edad que recibieron la vacuna contra tétanos en la infancia y/o adultez sin importar el número de dosis o esquema de vacunación. La muestra fue tomada en el departamento de Cochabamba. Resultados: Estos datos se traducen en un porcentaje de 27,80 % (107) de pacientes masculinos, 6,23 % (24) no tienen anticuerpos y 21,56 % (83) sí presentan anticuerpos. Mientras tanto, en el grupo de pacientes femeninos, el 13,25 % (51) no tiene anticuerpos y el 58,96% (227) sí los tiene presencia de anticuerpos contra el tétanos. Conclusión: El 80,52 % (310) de los pacientes cochabambinos analizados presentan niveles detectables de anticuerpos contra el tétanos, lo que sugiere una respuesta inmune humoral adecuada a la vacunación. Por otro lado, el 19,48 % (75) de los pacientes no presentan niveles detectables de anticuerpos. Fecha de recepción: 25/04/2024. Fecha de evaluación: 08/05/2024. Fecha de aprobación: 17/05/2024.
RESPUESTA INMUNE HUMORAL CONTRA SARS-COV-2 OTORGADA POR SPUTNIK V Y SINOPHARM EN POBLACIÓN BOLIVIANA
(2024) Brenda Gisela Martinez Oliva; Elma Rossell; Denisse Ulloa; Dayana Pamela Bello- Kopa; Ricardo Enrique Grados Torrez
Introducción: Las vacunas anti-SARS-CoV-2 inducen la producción de anticuerpos neutralizantes tipo IgG contra el Dominio de Unión al Receptor (RBD) de la proteína S del virus. En Bolivia, las vacunas Sinopharm y Sputnik V fueron ampliamente utilizadas durante la pandemia, sin embargo, existen pocos datos sobre la inmunidad humoral en población boliviana vacunada. Objetivo: Comparar la respuesta humoral conferida contra SARS-CoV-2 por las vacunas Sinopharm y Sputnik V, mediante cuantificación de IgG anti-RBD, producidos por individuos bolivianos, tras 21 días del cumplimiento del esquema completo de vacunación. Materiales y Métodos: Se incluyeron 231 personas vacunadas con Sinopharm y 420 con Sputnik V. La medición de IgG anti-RBD se realizó por ELISA. Resultados: El 87,9 y 88,8 % de las personas vacunadas con Sinopharm y Sputnik V, respectivamente, fueron positivos para IgG anti-RBD. De acuerdo a la edad, las personas mayores de 69 y 59 años vacunadas con Sinopharm y Sputnik V, correspondientemente, mostraron niveles más bajos de IgG anti-RBD en comparación con personas más jóvenes (p<0,0001). Para ambas vacunas, no hubo diferencias significativas en los niveles de anticuerpos entre hombres y mujeres, sin embargo, los vacunados con Sputnik V reportaron niveles más altos de IgG anti-RBD en comparación con los vacunados con Sinopharm (p<0,0001). Conclusiones: Sinopharm y Sputnik V generan protección humoral en población boliviana, aunque existe disminución significativa en el nivel de IgG anti-RBD en mayores a 69 y 59 años de edad respectivamente. Fecha de recepción: 03/08/2023. Fecha de evaluación: 15/04/2024. Fecha de aprobación: 17/05/2024.
Sensibilidad y especificidad de pruebas inmunocromatográficas utilizadas en el nuevo algoritmo de diagnóstico de VIH en Bolivia
(2018) Brenda Gisela Martinez Oliva; Karen Jimena Montaño-Valenzuela; Patricia Rodriguez-Herbas; Amilcar Alejandro Flores Leon; Ricardo Enrique Grados-Torrez
Objetivo: evaluar la sensibilidad y especificidad de dos pruebas rápidas utilizadas en el nuevo algoritmo de diagnóstico de VIH en Bolivia, Alere DetermineTM HIV 1/2 como prueba de tamizaje y Uni-GoldTM HIV como prueba confirmatoria. Métodos: estudio descriptivo, no experimental. Se utilizaron 60 muestras de suero provenientes de diferentes establecimientos de salud de Cochabamba con resultados reactivos para VIH, enviadas a LABIMED desde enero a junio de 2016 para confirmación. Las 60 muestras (27 positivas y 33 negativas para VIH) fueron procesadas con Alere DetermineTM HIV 1/2 y Uni-GoldTM HIV. Resultados: alere DetermineTM HIV 1/2 presentó una sensibilidad del 100% y una especificidad del 54,5%. Uni-GoldTM HIV reportó una especificad del 97% y una sensibilidad del 92,6%. Conclusiones: la sensibilidad de Alere Determine TM HIV 1/2 cumplió con el criterio del Ministerio de Salud y Deportes de Bolivia (Prueba rápida de tamizaje debe tener una sensibilidad ? 99,8%). La especificidad de Uni-GoldTM HIV en este estudio no alcanzó el criterio de especificidad del Ministerio (Prueba rápida de confirmación debe tener una especificidad ? 99,9%).
Sistema Inmune, Infección por SARS-CoV-2 y Desarrollo de COVID-19
(2021) Vivian Medrano; Aleida Verduguez-Orellana; Brenda Gisela Martinez Oliva; Miguel Guzmán-Rivero; Marisol Córdova
La infección por SARS-CoV-2 promueve un descontrol del sistema inmune con predominio de una respuesta inflamatoria de rápida instauración y el desencadenamiento de una tormenta de citocinas. El objetivo de esta revisión es comprender mejor los mecanismos inmunológicos y su descontrol activados por SARS-CoV-2. La activación de la inmunidad innata, contra la infección, es el factor clave para el control viral o su progresión hacia COVID-19. La respuesta inmune adaptativa, igualmente es perturbada por SARS-CoV-2 con lo cual se posibilita una mayor tasa de infección, así como también el descontrol inmunológico sistémico que puede desencadenar shock y daño tisular en diferentes órganos, muerte por COVID-19 o autoinmunidad post COVID-19.
TERAPIA DE CÉLULAS ADOPTIVAS EN CÁNCER DE MAMA
(2021) Brenda Gisela Martinez Oliva; Marlene Patricia Zurita Jiménez
La inmunoterapia o terapia biológica, constituye un grupo de nuevos tratamientos para el cáncer, que en algunos casos utiliza moléculas y células modificadas en laboratorio para estimular y mejorar la respuesta natural 72 antitumoral del sistema inmune, estas nuevas terapias incluyen modificar los receptores de linfocitos T, generar anticuerpos monoclonales para sitios clave, adicionar coestimuladores, secretar citoquinas, etc. El objetivo de la terapia de células adoptivas es potenciar la capacidad natural de los linfocitos T modificando la región VL y VH y adicionando genes que transcriben moléculas importantes del Sistema Inmune; en primera instancia las células son obtenidas del paciente y tratadas en laboratorio con un lentivirus y factores de crecimiento, posteriormente son introducidas nuevamente en el paciente vía endovenosa, posteriormente los linfocitos transformados atacan a las células neoplásicas, sin embargo también se observan algunas barreras a ser superadas, como la presencia de inhibidores de puntos de control y el microambiente tumoral. Esta terapia también recibe los nombres de terapia de células inmunitarias. En el presente artículo se realiza un análisis de la aplicación de esta terapia en el cáncer de mama con el fin de analizar los avances, ventajas y dificultades y una posible aplicación en nuestro medio. Fecha de recepción: 07/05/21Fecha de evaluación: 02/06/21Fecha de aprobación: 07/06/21
VACUNACIÓN CONTRA COVID-19 EN BOLIVIA: CARACTERÍSTICAS
(2023) Brenda Gisela Martinez Oliva; Francis Lene Oliveira Machado
Para enfrentar la pandemia por COVID-19 Bolivia implementó medidas de contención reflejadas en el Plan Nacional de vacunación que contempla realizar pruebas diagnósticas rápidas, vacunar masivamente mediante mecanismo COVAX y compra directa de vacunas y coordinar la implementación de vacunación universal gratuita. El personal de salud fue el primer grupo vacunado y hasta diciembre de 2021 se habilitó la vacunación para menores de edad de 5 a 11 años. Con relación a los puntos de vacunación, Beni es el departamento con menos puestos y Santa Cruz concentra la mayor cantidad; a pesar de los esfuerzos solo el 52,8 % de la población boliviana cuenta con un esquema completo donde Santa Cruz y Pando registran el mayor y menor porcentaje de vacunados respectivamente, según reporte hasta octubre de 2022, si se compara este porcentaje con los demás países latinoamericanos se observa que Bolivia es el 8vo país con menos vacunados. La distribución de vacunas anti COVID-19 reveló problemas importantes en Bolivia, en relación con requerimientos mínimos de insumos para conservación de vacunas, mecanismos y políticas de aplicación de dosis a los grupos vulnerables. Fecha de recepción: 21/12/2022.Fecha de evaluación: 07/04/2023.Fecha de aprobación: 15/05/2023.