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Caracterización de tres sistemas de identificación genética humana en manchas de sangre de data antigua.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2019) Cadena Mamani, Rusvania; Luna Barrón, Ruddy
En el presente trabajo se caracterizó tres sistemas de identificación genética humana los cuales son: las secuencias cortas en tándem autosómicos (strs), secuencias cortas en tándem del cromosoma y (y-strs), además de las secuencias del ácido desoxirribonucleico mitocondrial que comprenden las regiones hipervariable i y la región hipervariable ii (hvi y hvii del adnmt). a partir de manchas de sangre de data antigua conservadas a temperatura ambiente y manchas sometidas a degradación inducida. inicialmente se realizó las pruebas orientativas colorimétricas de sangre prosiguiendo con la tipificación del adn el mismo que comprende las siguientes fases: extracción, cuantificación, la pcr y electroforesis capilar. la caracterización de manchas de sangre de data antigua se la misma se considera un reto técnico debido a las mismas fueron sometidas a condiciones extremas de exposición (radiación uv ionizante, la data de la muestra, temperatura a la cual estuvo expuesta y otros factores), que influyen en el éxito o el fracaso del análisis molecular de estas pruebas, para la caracterización de los tres sistemas de identificación genética humana. la metodología consistió en la obtención y preparación de las muestras, se realizó las pruebas orientativas colorimétricas para la detección de sangre a través de las pruebas de leucomalaquita, klastemayer, luminol y la prueba confirmatoria de sangre aplicando el test de identificación rápida de manchas (rsid).prosiguiendo con la extracción del adn, la electroforesis en gel de agarosa, la cuantificación, la amplificación por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (pcr) de los siguientes marcadores de adn: (strs, y-strs y la región hvi y hvii del adnmt) y finalmente se realizó la electroforesis capilar. Los resultados obtenidos muestran los electroferogramas de secuencias completas y parciales de los diferentes marcadores genéticos utilizados en la detección del adn recuperado de manchas de sangre de data antigua e inducida a degradación. la cantidad relativa de amplicones y el número de nucleótidos obtenidos depende del grado de degradación de cada muestra y el resultado de la amplificación de adn para cada uno de los sistemas; por lo tanto las manchas de sangre de data antigua con mayor tiempo de exposición dentro de la cámara de inducción y otras muestras de data antigua presentaron una baja amplificación causando un desbalance de alelos (picos del electroferograma), observándose una disminución de altura de los picos en los electroferogramas de los sistemas (strs, y-strs) y una disminución del número de nucleótidos en las secuencias. Se realizó la caracterización de los tres sistemas de identificación genética humana, con la finalidad de determinar que sistemas son los más indicados en el trabajo de laboratorio para recuperar el adn degradado de muestras de data antigua y además que han sido sometidas a condiciones extremas ambientales en el transcurso del tiempo. y aplicar este conocimiento en investigación de casos forenses, casos de interés histórico y antropológico, además de la resolución de casos judiciales entre muchos otros.
Diagnostico Serológico de Hantavirus en el Departamento de La Paz, Bolivia, en la gestión 2022
(Rev.Cs.Farm. y Bioq, 2022) Delgado Casazola, Jenny; Cadena Mamani, Rusvania; Santalla Vargas, José
Introducción: El síndrome pulmonar por hantavirus (SPHV) es una enfermedad viral aguda causada por miembros del género Orthohantavirus, familia Bunyaviridae transmitida por roedores presente en zonas tropicales y semitropicales del departamento de La Paz. Objetivos: Diagnosticar hantavirus por serología IgG e IgM, en el noreste del Departamento de La Paz, Bolivia, en pacientes con sospecha de infección por Hantavirus mediante la prueba de ELISA y realizar un análisis epidemiológico básico. Materiales y Métodos : Este trabajo es un estudio de tipo transversal descriptivo, se utilizó el método de diagnóstico ELISA (Euroinmun) para detectar la presencia de anticuerpos inmunoglobulina M (IgM) e inmunoglobulina G(IgG) para hantavirus en muestras de suero, con un universo de 138 muestras de Enero a Agosto de la gestión 2022 en pacientes con sospecha de infección por Hantavirus enviadas de distintos hospitales y centros de salud al Laboratorio de Virología del Instituto Nacional de Laboratorios en Salud (INLASA). Resultados y Conclusiones: Se detectó presencia de IgM e IgG para hantavirus en las muestras de suero procesadas por serología en el Laboratorio de Virología, de las cuales de 138 muestras, un 12% son positivas para IgG, 4% positivos para IgM y el 84%, restante es negativo. Estas muestras provienen de centros y establecimientos de salud del noreste del Departamento de La Paz, observándose un mayor porcentaje de casos en el sexo masculino afectando al grupo etario de 41 a 50 años y existiendo un número elevado de casos presentes entre los meses de febrero y abril, además de observar signos y síntomas registradas en fichas epidemiológicas.