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Asociación de los niveles urinarios del inductor débil de la apoptosis de la familia del factor de necrosis tumoral (TWEAK), proteína Quimioatractante de monocitos - 1 (MCP-1) y los marcadores serológicos con la remisión y reactividad de la nefropatía lúpica.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2018) Casablanca Alarcon, Esther
El Inductor débil de la apoptosis de la familia del factor de necrosis tumoral (TWEAK) es una citoquina multifuncional que controla muchas actividades celulares, incluida la proliferación, la migración, la diferenciación, la apoptosis, la angiogénesis y la inflamación. Además, tiene un papel importante en la patogénesis de la nefropatía lúpica (NL), su producción estimula a las células renales a producir distintas citoquinas proinflamatorias. Otra de las quimioquinas que tiene participación en la NL es la proteína quimioatractante de monocitos-1 (MCP-1) que se produce en los riñones por células mesangiales, endoteliales y monocíticas en respuesta a la presencia de inmunocomplejos y mediadores inflamatorios, es responsable de la infiltración de leucocitos en el riñón. Investigaciones previas han demostrado que los niveles tanto de TWEAK y MCP-1 en la orina de pacientes con NL, se correlacionan con la actividad de la enfermedad. Su excreción en la orina es un excelente indicador de su producción y secreción local, y por lo tanto puede tener más potencial que un marcador basado en suero para reflejar la actividad inflamatoria en el riñón. OBJETIVO: Asociar los niveles urinarios del TWEAK, MCP-1 y los marcadores serológicos con la remisión y reactividad de la nefropatía lúpica METODOLOGÍA: Se incorporaron 85 pacientes (22 pacientes control y 63 pacientes caso), los cuales firmaron su consentimiento para participar en el estudio. El grupo control correspondía a pacientes sin antecedentes clínicos y familiares de enfermedad autoinmune. El grupo caso cumplía al menos 4 criterios de la Sociedad Americana de Reumatología. Este grupo fue subdividido en 4 subgrupos en función a la actividad de la enfermedad, la actividad de la enfermedad fue evaluada por los niveles de anti-ds-DNA y niveles de complemento C3 y C4; mediante qRT-PCR se midió los niveles de expresión de la citoquina TWEAK y la quimioquina MCP-1 en muestras de orina de pacientes lúpicos, los niveles de estas moléculas fueron asociados con los valores séricos de los marcadores serológicos comúnmente empleados en la clínica. RESULTADOS: La expresión urinaria de mRNA de TWEAK y MCP-1 estaba significativamente aumentada en pacientes con NL activa (P <0,05). La expresión de TWEAK se correlacionó positivamente con los niveles séricos de anticuerpos anti-ds-DNA, anti-nucleosoma y niveles de β2-microglobulina (r = 0,414 p < 0,001; r = 0,405 p < 0,001; r = 0,427 p < 0.001). El nivel de expresión de MCP-1 se asoció positivamente con los niveles de expresión de TWEAK (r = 0,299 p = 0,031), los niveles séricos de anticuerpos anti-ds-DNA y anti-nucleosoma (r = 0,390 p < 0,05; r = 0,376 p < 0,05). CONCLUSIONES: El presente estudio demuestra que la MCP-1 y TWEAK pueden ser considerados como biomarcadores de la actividad de la NL.
Optimización de las condiciones de cultivo anaerobico termofilo para aumentar la producción enzimatica de Xinalasas y B-Glucosidas con cepas bacterianas encapsuladas y libres.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2009) Casablanca Alarcon, Esther
Las bacterias productoras de enzimas termófilas son de gran interés en la biotecnología debido a que tienen diversas aplicaciones en la industria por su estabilidad extrema. Estos biocatalizadores pueden ser empleados en la preparación de la pulpa del papel, procesamiento de alimentos agroindustriales, conversión de la hemicelulosa a biomasa, etc.. Las xilanasas y _-glucosidasas tienen gran importancia en el campo de la industria. Es por eso que el propósito de este trabajo es aumentar la producción enzimática de las xilanasas y _-glucosidasas de tres cepas bacterianas FT3, 2B y P5 anaerobias termófilas; aisladas de muestras obtenidas del altiplano boliviano. La cepa bacteriana FT3 mostró la mayor actividad xilanolítica de 2.0 UI/mL y _-glucosidasa de 48 UI/mL. Se optimizaron la fuente de nitrógeno, la fuente de carbono y el pH, del medio de cultivo tanto en células encapsuladas como en libres. La mejor fuente de nitrógeno fue el extracto de levadura llegándose a obtener una actividad xilanolítica y _-glucosidasa de 2.46 UI/mL y 85 UI/mL respectivamente; y como mejor fuente de carbono la paja de soya (Glycine max) como materia cruda obteniéndose una actividad xilanolítica de hasta 2.51 UI/mL. Del mismo modo en la optimización de _-glucosidasas la mejor fuente de carbono fue paja de trigo (Paja Triticum spp.) como materia hidrolizada, llegando a obtenerse una actividad de hasta 228 UI/mL, y la mejor fuente de nitrógeno fue extracto de levadura cuando se trabajo con bacterias libres y encapsuladas. En la optimización del pH del medio de cultivo las mejores actividades fueron de 3.39 y 144 UI/mL de xilanasas y _-D-glucosidasas, obtenidas a pH de 8 y 9 respectivamente.