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Epidemiología, Características clínicas y Severidad de la Enfermedad diarreica aguda causada por Norovirus y Rotavirus en niños menores de 5 años Hospitalizados con diarrea aguda pertenecientes a la Red de Monitoreo de Rotavirus en Bolivia durante el periodo 2008 – 2010
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2013) Colquillo Aysallanque, Bladimir
En Bolivia, las enfermedades diarreicas agudas (EDA) representan la segunda causa de morbi-mortalidad infantil. Este estudio comparó la epidemiología y clínica de Norovirus (NoV) y Rotavirus (RV) en niños <5 años hospitalizados por diarrea en seis hospitales de Bolivia entre el 2008-2010. De 2612 muestras analizadas, el RV fue el más frecuente (37.4%), seguido de NoV (17.9%) y de co-infecciones RV/NoV (4.6%). El genogrupo NoV-GII fue predominante (~62%) sobre GI/GII (23%) y GI (9.2%). RV presento un desplazamiento y reducción (15%) de su principal pico epidémico en relación a lo observado en años anteriores, concomitante con el incremento (7%) de NoV. Entre los casos NoV y RV, no se encontraron diferencias en la media de edad de infección (9 – 11 meses). La EDA por RV fue mayor y con riesgo significativo asociado a alta frecuencia de deshidratación, desequilibrio electrolítico, acidosis metabólica, hidratación intravenosa y mayor índice de severidad (IS). Entre los casos RV, los mayores IS se registraron en el grupo de 3 – 8 meses, y en los episodios con 6 – 10 deposiciones/24H. La EDA por NoV, presento asociación con mayor estancia hospitalaria. El comportamiento estacional de ambos virus es diferente; los picos de NoV preceden y suceden a los picos mayores de RV. Los brotes de NoV en los meses de verano-otoño coinciden con mayor precipitación e incremento en la humedad relativa y temperatura. Los resultados de este trabajo muestran que NoV es un patógeno emergente en niños <2 años. Con la introducción de la vacunación de RV, es probable que la importancia relativa de NoV incremente en el tiempo, ante la disminución de la carga de la enfermedad de RV. Estos datos subrayan la importancia de que la epidemiología de la infección por NoV y RV debe ser monitoreada continuamente.
Establecimiento del diagnóstico molecular de la hepatitis C a través de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa de transcripción reversa y monitoreo mediante el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2013) Colquillo Aysallanque, Bladimir
La Hepatitis debida a virus se ha convertido en uno de los principales problemas emergentes de salud. De los virus hepatótropos, el Virus de la Hepatitis C (VHC) realza importancia ya que produce cronicidad en aproximadamente el 85 por ciento de los casos. Más de un millón de casos son registrados anualmente a nivel mundial y se estima que la infección por este virus es más prevalente que la infección por el Virus de la Hepatitis B, más aún debido a que no existe una vacuna ni un tratamiento exitoso que erradique eficazmente la infección. Una vez que una persona contrae la infección por el VHC, en la mayoría de los casos durará toda la vida. Los métodos de diagnóstico no siempre pueden ser aplicados por deficiencias inherentes a los mismos. Ventajas como la alta sensibilidad y especificidad en ensayos moleculares hacen que los costos sean elevados; los métodos serológicos son más accesibles pero presentan una gran problemática, resultados Falso negativos. El presente estudio tiene como objetivo establecer el diagnóstico molecular de la Hepatitis C a través del RT-PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcripción Reversa) mediante monitorización a través del EIA (Ensayo Inmunoabsorbente Ligado a Enzimas). En 56 muestras de sueros reactivos Anti-VHC procedentes de Centros de salud de la Ciudad de La Paz, entre Febrero del 2006 a Junio del 2007 evaluados por RT-PCR y ensayos EIA de tercera (3.0) y Cuarta (4.0) Generación, se encontró un 32,14 por ciento de amplificación (RT-PCR positivos), y un mayor grado de reactividad en el EIA 4.0 (73,21 por ciento) en comparación al 3.0 (28,3 por ciento), no obstante el grado de concordancia para ambos EIA's es Insignificante [K= 0,07; IC 95 por ciento (0.0031,0.1387)]; por otro lado, cuando muestras RT-PCR positivas se compararon con los EIA's, existió mayor concordancia del RT-PCR con el EIA 4.0 (66,7 por ciento) que con el 3.0 (37,5 por ciento) (verdadero-positivos). En ensayos Inmunoenzimáticos, la posibilidad de reacción cruzada (Especificidad analítica) fue descartada ya que no se encontraron resultados Falso positivos; el límite de detección en una serie de diluciones (Sensibilidad analítica) usando un control positivo Anti-VHC UKAS-NIBSC, mostro resultados difícilmente correlacionables y comparables a muestras, debido a la carencia de un "Gold Estandar" que cuantifique el título de anticuerpos. Finalmente, de los tres métodos de extracción de RNA para RT-PCR desarrollados, el Protocolo Fenol/Cloroformo es el más efectivo (60 por ciento RT-PCR positivos), alternativamente pueden usarse los métodos de extracción Powder Glass y Trizol LS. De acuerdo a estos resultados, se estableció el Diagnóstico molecular del VHC a través del RT-PCR debido a su alta especificidad para identificar secuencias genómicas específicas, conservadas y por lo tanto presente en todos los genotipos virales, sin embargo se sugiere que el diagnóstico debe ser previamente monitorizado mediante la implementación de los ensayos EIA 4.0 en los laboratorios de rutina. Consideramos que muestras con Índice de Reactividad Serológica (ISR) ?1,0 en EIA 4.0 muestran una mejor correlación y deberán someterse a confirmación por RT-PCR. Esta misma aseveración es dudosa en EIA 3.0.