Browsing by Autor "Darrell L. Peterson"
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Item type: Item , Expresión y purificación del antígeno preS1/2 y su utilidad en el estudio de la patogenia de la infección por el virus de la hepatitis B(Universidad Autónoma del Estado de México, 2013) Masyelly Rojas; Juan Camilo Valencia-Molina; Daniela Montes-Berrueta; Gery Rosmary Ruiz-Carrillo; Leidith Berrueta-Carrillo; Darrell L. Peterson; Lisbeth Berrueta; Siham Salmen"El preS1/2 es parte de las proteínas de envoltura del virus de la hepatitis B (VHB), con funciones importantes en la inmunopatogenia de la enfermedad. Para su estudio es necesario contar con la proteína pura y así dilucidar su participación en el daño generado en el tejido hepático. Para ello se procedió a la expresión del preS1/2 previamente clonado en el vector peT3d, en la cepa de E coli HMS174 (DE3), seguido por su purificación mediante columnas de afinidad hacia residuos de histidina (6xhistidina) y finalmente sometidas a liberación de contaminantes mediante el uso de columnas de afinidad hacia endotoxina y filtración por centrifugación, de esta manera utilizarla para evaluar su efecto sobre hepatocitos humanos. El procedimiento utilizado permitió obtener 1,5 mg de proteína pura funcionalmente estable por cada litro de medio de cultivo. En este trabajo se describe un método sencillo de expresión y purificación del preS1/2 recombinante y se evidencia la obtención de un producto intacto, con potencial uso en estudios funcionales y futuros ensayos terapéuticos."Item type: Item , NEF-HIV-1 incrementa la expresión del factor de transcripción FOXP3 en monocitos humanos(Universidad Internacional de La Rioja, 2013) Juan Camilo Valencia; Guillermo Terán Ángel; Luisa Barboza; Darrell L. Peterson; Lisbeth Berrueta; Siham SalmenIntroducción: Un mecanismo utilizado por el VIH para evadir la respuesta inmune es favoreciendo una respuesta reguladora al incrementar las Células T Reguladoras (TREG) durante la infección, estas células expresan Foxp3, un factor de transcripción asociado con actividad supresora, cuya presencia ha sido confirmada en monocitos y macrófagos. Siendo los monocitos/macrófagos susceptibles a la infección VIH-1, y uno de los principales reservorios virales, se evaluó el papel de Nef (una de las principales proteínas reguladoras del VIH), en la expresión de Foxp3 en monocitos humanos. Nef-VIH-1 fue expresada en E. coli y la proteína purificada se expuso a monocitos de sangre periférica de individuos seronegativos. La expresión de Foxp3 fue analizada mediante citometría de flujo y western-blot.