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Actividad antiparasitaria in vitro de plantas de la medicina tradicional Tacana sobre Plasmodium faciparum a través del método fluorométrico-SYBR GreenI
(Rev.Cs.Farm. y Bioq, 2020) Condo, Claudia; Salamanca, Efraín; Ticona, Juan; Udaeta, Enrique; Limachi, Ivan; Flores, Ninoska; Alcides; Marupa, Natalio; Chao, Benigno; Giménez, Alberto
Introducción: La presencia de compuestos activos en las plantas las posiciona como una fuente alternativa para el descubrimiento de nuevos fármacos. Objetivo: Realizar la bioprospección de plantas utilizadas en la Medicina Tradicional Tacana frente a cultivos de Plasmodium falciparum. Métodos: Se obtuvieron extractos por maceración en etanol a temperatura ambiente, de 31 órganos colectados de 23 plantas, estos fueron evaluados sobre cultivos asincrónicos de la cepa de Plasmodium falciparum resistente a la Cloroquina (FCR3). A los extractos que mostraron actividad antiplasmódica (CI50<20ug/mL)/ se evaluó la citotoxicidad (DL50) frente a células HeLa y se calculó el Índice de Selectividad (IS=DL50/CI50). Los extractos que dieron resultados IS>5, fueron seleccionados como promisorios. Resultados: Se obtuvieron 3 plantas muy activas (CI50<10ug/ml_); 2 moderadamente activas (10ug/mL<CI50<15ug/ml_); 4 plantas poco activas (15ug/ml_<CI50<20ug/ml_) y 14 plantas inactivas (CI50>20ug/ml_). De las 9 plantas que presentaron actividad, solo 2 plantas presentaron IS>5. Conclusiones: Incorporar los conocimientos del uso tradicional para realizar las evaluaciones biológicas es de mucha ayuda en la selección de plantas con efectos antiplasmódicos.
DETERMINACIÓN GENOTÓXICA DEL EXTRACTO TOTAL DICLOROMETÁNICO DE CORTEZA DE GALIPEA LONGIFLORA KRAUSE, MEDIANTE EL TEST DE MUTACIÓN Y RECOMBINACIÓN SOMÁTICA (SMART)
(Rev. Bol. Quim, 2006) Mamani, Pseidy L.; Gonzales, Mónica; Pillco, Araceli; Giménez, Alberto; Gonzales, Eduardo L.
En el presente estudio se determinó la actividad genotóxica del extracto total diclorometánico de corteza de Evanta (Galipea longiflora Krause), mediante la Prueba de Mutación y Recombinación Somática (SMART) versión alas, que emplea a Drosophila melanogaster como organismo experimental. Larvas de tercer instar procedentes de los cruces Estándar (con bioactivación normal) y Alta bioactivación (con incremento del citocromo P-450) fueron tratadas con concentraciones de 30, 60, 125, 250 y 500 ug/mL del extracto y un control negativo, que fue el diluyente. Los resultados obtenidos mediante el estadístico de Kastenbaum-Bowman (α=0,05.), sugieren que el extracto diclorometánico de Evanta no produce daño genotóxico, a las concentraciones evaluadas mediante la prueba SMART, en las condiciones experimentales empleadas en el presente trabajo.
ESTUDIO FITOQUÍMICO DE LAS HOJAS DE BOWDICHIA VIRGILIOIDES
(Rev. Bol. Quim, 2006) Ticona, Juan Carlos; Gutierrez, David; Salamanca, Efraín; Ruiz, Grace; Paredes, Crispín; Udaeta, Enrique; Rodríguez, Nayra; Garcia, Gabriel; López, Isabel; Jiménez, Antonio; Alvarado, Pedro; Chuqui, Rogelio; Flores, Ninoska; Giménez, Alberto
Bowdichia virgilioides, es una planta medicinal utilizada por la etnia Tacana, las hojas de este árbol fueron colectadas, en época seca, en la Prov. Abel Iturralde, Bolivia. Las hojas secas y pulverizadas fueron sometidas a maceración con diclorometano y el extracto crudo no presento actividad antipalúdica a dosis de 10μg/mL, frente a Plasmodium falciparum (cepa F32, sensible a la cloroquina). Estudios cromatográficos del extracto crudo y análisis espectroscópicos de las sustancias aisladas nos han permitido identificar: Lupeol (1), Lupenona (2), β-sitosterol (3), estigmasterol (4) y β-amirina (5), como los principales componentes triterpénicos acompañados de ácidos grasos no identificados.
Estudios de susceptibilidad de cepas de Leishmania aethiopica frente a alcaloides de Galipea longiflora (Evanta)
(Rev.Cs.Farm. y Bioq., 2016) Endalamaw, Gadisa; Abraham, Aseffa; Salamanca, Efrain; Ticona, Juan Carlos; Udaeta, Enrique; Giménez, Alberto; Flores, Ninoska; Chuqui, Rogelio
El Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas (IIFB), dela Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, de la UMSA, desarrolla trabajos sobre la actividad leish-manicida, de los alcaloides totales (CAT) obtenidos de la corteza de la especie medicinal amazónica conocida como Evanta (Galipea longiflora) por los Pueblos Tacana, Tsimane y Mosetene. Como parte de las actividades del Proyecto UMSA-ASDI "Biomoleculas de interés medicinal e industrial (antiparasitarios)" hemos podido contar con la estadía, en el IIFB, de un investigador del Armauer Hansen Research Institute (AHRI) de Etiopia, lo que nos ha permitido desarrollar evaluaciones de CAT, Miltefocine y Amfotericina B, frente a cepas de Leishmania aethiopica, agente causante de las diversa formas de Leishmaniais cutánea en Etiopía. Un total de seis cepas, de L. aethiopi ca, fueron adaptadas a condiciones in vitro y mostraron un comportamiento homogéneo frente a CAT, cinco de estas cepas mostraron un valor promedio de IC50 = 8,68 ± 1,56 mg/mL, valor algo inferior a los calculados para nuestras cepas de referencia, L. ama-zonensis y L. braziliensis con IC50 = 11,73 ± 4,32 mg/mL y IC50 = 12,28 ±- 2,95 mg/mL, respectivamente. Excepto por una cepa de L. aethiopica que mostro valores consistentemente más elevados que el resto con IC50 = 14,37 ±3,58 mg/mL. Como consecuencia de esta interacción científica, la Universidad Mayor de San Andrés (UMSA) ha firmado un Memorandum de Entendimiento para el desarrollo de investigaciones conjuntas, con el Armauer Hansen Research Institute (AH RI), dependiente del Ministerio de Salud de Etiopia y explorar la posibilidad de que nuestra experiencia de validación clínica con Evanta en el tratamiento de leishmaiasis cutánea, en Bolivia, podría ser replicada en Etiopía, donde se reportan entre 20,000 a 30,000 nuevos casos de Leismaniasis por año.
ESTUDIOS QUÍMICOS, BIOLÓGICOS Y FARMACOLÓGICOS DE Galipea longiflora, KRAUSE
(Rev. Bol. Quim, 2005) Giménez, Alberto; Avila, J. Antonio; Ruiz, Grace; Paz, Magali; Udaeta, Enrique; Ticona, J. Carlos; Salamanca, Efraín; Paredes, Crispín; Rodríguez, Norka; Quints, Katia; Feraudy, Carolina; Gutiérrez, Iván; Chuqui, Rogelio; Quenevo, Celin; Dalence, Maria Fanny; Bascope, Marcelo
La especie medicinal Galipea longiflora (Evanta) es utilizada por las etnias amazónicas: Tacana, Mosetene y Tsimane, como antiparasitario. Los alcaloides totales de esta especie vegetal serán centro de estudios clínicos como tratamiento alternativo para la leishmaniasis cutánea. Nuestros estudios detallan el aislamiento y caracterización de alcaloides quinolínicos, de la corteza y hojas, todos con actividad leishmanicida evaluada sobre promastigotes de: L. amazonensis, L. braziliensis, L. donovani y L. chagasi. Mediante modelos toxico cinéticos, se ha determinado la toxicidad aguda, subcrónica y parámetros fármaco-cinéticos, para el extracto crudo, en modelo murino. Se establecen las condiciones para el cultivo semi-continuo, in vitro, de células de Evanta.
Evaluación de la capacidad biocontroladora de metabólicos de Trichoderma inhamatum Bol12 QD sobre cepas nativas de Phytophthora infestans in vitro
(J. Selva Andina Res. Soc., 2011) Puño, Ramon; Terrazas, Enrique; Alvares, Teresa; Giménez, Alberto; Mendoza, Laura; Smeltekop, Hugh; Loza-Murguia, Manuel
Phytophthora infestans es un fitopatógeno causante de la disminución del rendimiento de los cultivos del tomate, para controlar estas pérdidas los agricultores utilizan productos químicos. Esto trae consecuencias al medio ambiente, la salud humana y los organismos benéficos del ecosistema. El objetivo fue obtener e identificar aislados nativos de Trichoderma spp., en suelos sembrados con tomate en Tlayacapan, Morelos (México), con problemas de Alternaria solani y Phytophthora infestans; asimismo, determinar su capacidad antagónica in vitro. Trichoderma se aisló directamente del suelo por el método de dilución en placa con medio de cultivo papa-dextrosa-agar (PDA). Por otro lado se realizaron diluciones en placa del fermento de T. inhamatum Bol12 QD producido en cultivos batch durante 30 días para comparar la efectividad del biocontrolador. Los fermentos filtrados inhibieron el crecimiento cinético micelial del agente causal en laboratorio; con la dilución 1:2 el crecimiento fue de 32,5%, para la dilución 1:4 el crecimiento micelial fue de 69,1% y finalmente para la dilución de 1:8 del fermento biocontrolador el micelio creció hasta un 95,2%. Para demostrar la actividad inhibitoria sobre el patógeno en campo, se produjeron cultivos de 3 L en batch durante 4 meses. La aplicación de tres dosis (puro, dilución 1:2 y dilución 1:4 más un testigo solamente agua) se realizó en un diseño de bloques completos al azar con cuatro repeticiones con el cultivo de tomate, perteneciente a la variedad Santa Cruz Kada Gigante, en las parcelas de la Unidad Académica Campesina-Carmen Pampa. El análisis estadístico por el test de Duncan mostró que el fermento puro redujo la infección de Phytophthora infestans de manera significativa en el tomate. Apareció otro fitopatógeno del tomate, Septoria lycopersici, durante el desarrollo del trabajo de campo. Se evaluó también el efecto de las dosis del fermento a esta enfermedad, y se notó igualmente una reducción significativa con todas las dosis del fermento. Con estos experimentos se demuestra que los fermentos de T. inhamatum Bol12 QD tienen efecto biocontrolador sobre el cultivo de tomate. La capacidad antagónica se evaluó mediante el método del papel celofán y la clase de antagonismo con la técnica de cultivos duales. Los datos se sometieron a un análisis de varianza y pruebas de Tukey. Se obtuvieron 20 aislados de Trichoderma. El rango de porcentajes de inhibición del crecimiento micelial de los fitopatógenos por los aislados varió desde 38.8 a 81.3% en A. solani; y desde 16.3 a 85.5% en P. infestans. Se seleccionaron 10 aislados que inhibieron al menos el 65% del crecimiento, que pertenecen a las especies: T. harzianum (Thz), T. longibrachiatum (Tl) y T. koningii (Tk). Los aislados Tl-17, Tl-19, Tl- 20, Tl-21, Thz-16 y Tk-4, seleccionados contra A. solani, presentan antagonismo clase 1, sobrecreciendo al fitopatógeno y esporulando sobre él. Los aislados THz-17, Thz-18, Tl-17, Tl-18 y Tl-19 seleccionados contra P. infestans, presentan antagonismo clase 2 y Thz19 antagonismo clase 3. Por su acción antagónica in vitro sobre P. infestans y A. solani, puede considerarse a Trichoderma como agente promisorio en el control biológico de las enfermedades que ocasionan estos fitopatógenos.
IN VITRO PRODUCTION OF LEISHMANICIDAL ALKALOID 2 PHENYL-QUINOLINE BY ANGOSTURA LONGIFLORA KRAUSE A
(Rev. Bol. Quim, 2008) Guarachi, Marina; Paz, Magaly; Chuqui, Rogelio; Sauvain, Michel; Flores, Ninoska; Alvarez, Ma Teresa; Giménez, Alberto
Angostura longiflora (K.) Kallunki (Rutaceae) is a medicinal wood tree used by Amazonian tribes for the treatment of stomach parasites and leishmaniasis. Cell cultures from leaves of this species were obtained on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with kinetine (kin) and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) based on a factorial design, where concentrations of sucrose and phosphate were changed. The increasing of sucrose and phosphate enhanced the specific growth rate from 0.16 to 0.33d-1. The leishmanicidal alkaloid, 2-phenyl-quinoline was isolated from calli and identified by means of nuclear magnetic resonance (NMR) and mass (EI) spectra. This is the first report concerning the production, isolation and chemical characterization by NMR and mass spectra of the main alkaloid, in Evanta leaves, 2-phenyl-quinoline from cell cultures of A. longiflora