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Actividad citotóxica in vitro en líneas celulares y células de sangre periférica humana de los alcaloides totales de corteza de Galipea longiflora (Evanta)
(Rev. Bol. Quim, 2009) Ruiz Pinell, Grace; Ríos Terán, Cecilia; Navarro Guarachi, Elvira; Ávila Illanes, Juan Antonio
The Galipea longiflora (Envanta) plant species has a variety of medicinal properties, primarily against leishmaniasis. The cytotoxic activity in vitro of Evanta was assessed using the total alkaloids from bark (TAB). The cytotoxic activity was evaluated in continuous cell culture (BHK-21, HEP 2 and MDCK) systems to different concentrations of alkaloids for 24 hours by the colorimetric method with XTT. The cytotoxic effect on lymphocytes and erythrocytes from human peripheral blood was measured at concentrations less than 250 µg/mL by exclusion of the vital dye Tripan Blue method. The cytotoxic effect on BHK-21 cells showed an IC50 of 105.7 µg/mL, for HEP-2 the IC50 was 164.8 µg/mL and on MDCK the IC50 was 173.7 µg/mL. The IC50 for erythrocytes was 154.2 µg/mL in 24 h and 157.6 µg/mL in 48 h and in lymphocytes the IC50 was 67.1 µg/mL. When amphotericin B was used regarding their potentially toxic effect for cells, the BHK 21 showed an IC50 34.39 µg/mL, for HEP 2 the IC50 was 37.7 µg/mL and for MDCK cells the IC50 was 27.2 µg/mL. The same experiment with amphotericin B showed in erythrocytes an IC50 12.75 µg/mL in 24 h and 10.4 mg/mL in 48 h and in lymphocytes the CI50 was 15.89 µg/mL. These results confirm a minimum toxic effect at high concentration of Evanta. In addition provide bases to suggest the TAB of Galipea longiflora (Evanta) has a high potential for developing drugs against Leishmania due to no significant toxic effects./ Se evaluó la actividad citotóxica in vitro de la Galipea longiflora (Evanta), especie vegetal a la que se le atribuye una variedad de propiedades medicinales, principalmente contra la leishmaniasis. La actividad citotóxica se evaluó en sistemas de cultivo celular continuo (BHK-21, Hep 2 y MDCK), a diferentes concentraciones de los alcaloides durante 24 horas y fue determinada por el método colorimétrico XTT. La actividad citotóxica de linfocitos y eritrocitos de sangre periférica humana fue medida a concentraciones por debajo de 250 µg/mL por el método de exclusión del colorante vital el azul tripán. Respecto al efecto citotóxico las células BHK-21 mostraron una CI50 105.7 µg/mL, Hep-2 CI50 164.8 µg/mL) MDCK CI50 173.7 µg/mL, en eritrocitos la CI50 fue de 154.2 µg/mL a las 24 h. y 157.6 µg/mL a las 48 h. y en linfocitos la CI50 67.1 µg/mL, con relación a la anfotericina B producto potencialmente tóxico para células BHK 21 (CI50 34.39 µg/mL), células Hep 2 (CI50 37.7 µg/mL) y células MDCK (CI50 27.2 µg/mL), eritrocitos (CI(50)12.75 µg/mL - 24 h. y 10.4 mg/mL - 48 h y en linfocitos 15.89 µg/mL). Evidenciandose un efecto tóxico mínimo a la concentración mas alta. Estos resultados aportan bases para sugerir que los ATC de la Galipea longiflora (Evanta) tiene un alto potencial para el desarrollo de medicamentos contra la Leishmania al no presentar efectos toxicos importantes
Determinación de la actividad Leishmanicida, Tripanocida in vitro y valoración de la toxicidad aguda del acido usnico in vivo.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2013) Navarro Guarachi, Elvira
Este estudio se realizó en el Laboratorio de Quimioterapia Experimental del Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas (I.I.F.B.) y en el Bioterío de la Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas. Se evaluó la actividad leishmanicida, tripanocida y la toxicidad aguda del ácido úsnico AU (C18H16O7). Este metabolito secundario extraído de un liquen Usnea spp, colectada en la localidad de Pazña (Oruro- Bolivia) se le atribuye una variedad de usos medicinales como antibacteriano y antifúngico. La actividad leishmanicida y tripanocida del AU se evaluó in vitro a través del método colorimétrico XTT (2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-2-H-tetrazolium-5-carboxanilide), utilizado para medir la viabilidad celular, basado en la reducción de la sal de tetrazolium a una forma soluble en agua, formazán, con fenasína metosulfato (PMS) como acoplador de electrones, con lecturas a 492 nm de longitud de onda a las 4 horas de incubación, contra promastigotes de L. amazonensis (IFLA/BR/75/PH8), L. braziliensis (MHOM/BR/75/M2903), L. donovani (MHOM/74/PP75) y contra epimastigotes de T. cruzi (tulahuen) a concentraciones de 100 a 31 µg/mL. El ácido úsnico mostró ser más activo contra L. braziliensis CI50 de 10.3 µg/mL que con L. amazonensis y L. donovani CI50 de 86.5 y 92.4 µg/mL respectivamente. Se uso anfotericina B como control positivo, CI50 de 0.2 µg/mL. El resultado fue significativo (P [ 0.05). Sobre la actividad tripanocida el ácido úsnico mostro un CI50 de 95.2 µg/mL en relación al beznidazol CI50 de 3.25 ?g/mL, (P [ 0.05). Por otro parte, se realizó un estudio de toxicidad aguda en ratones Swiss albinos hembras, mediante la determinación de la Dosis Letal Media (DL50) a través del método matemático de Reed Muench y por el método gráfico de Probit, dando un (DL50) de 798.47 mg/kg y 776.25 mg/kg, empleando dosis de 2000 mg/kg, 1000 mg/kg, 775 mg/kg, 662 mg/kg, 550 mg/kg y 175 mg/kg administradas por vía orogástrica, realizándose observaciones durante 14 días. Según el criterio de Williams el ácido úsnico es considerado un producto ligeramente tóxico. Estos resultados aportan bases para proponer que el ácido úsnico tiene potencial para el desarrollo de medicamentos contra la leishmania, lo cual debe ser validado en modelos in vivo en animales.