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Espectrofotometría de Absorción Molecular Ultravioleta como una herramienta para estudiar el crecimiento de Las Cepas ATCC 25922 Y ATCC 35218 de Escherichia Coli
(2016) Pedro Romero; Eliana Ramírez; Judith Araque; Olga M. Belandria; Jessica María Mulford Durán
Se estudio la curva de crecimiento de cepas ATCC 25922 y ATCC 35218 de Escherichia coli en medio de cultivo Tripticasa de Soya y cultivadas durante 24 horas, provenientes del Laboratorio de Microbiologia del Agua de la Facultad de Farmacia y Bioanalisis de la Universidad de Los Andes en Merida-Venezuela, utilizando la tecnica de Espectrofotometria de Absorcion Molecular Ultravioleta. Se realizo un barrido espectral desde 240 a 290 nm, obteniendose el pico de maxima absorcion a longitud de onda de 260 nm para ambas cepas. Fueron determinadas las fases de las curvas de crecimiento, a diferentes pH (7,0; 5,0 y 9,0) y diferentes temperaturas (37oC y 25oC). Los resultados obtenidos a las 48 horas del crecimiento de las cepas, muestran una disminucion del pH independientemente del pH inicial del medio. Asi mismo, se observa mayor acidificacion en los cultivos con la cepa ATCC 35218 que en los cultivos con ATCC 25922. Los resultados indican que las condiciones ideales para el crecimiento de ambas cepas son pH 7,0 y temperatura de 37oC, aunque la bacteria se adapto y crecio a pH 9,0 y 25oC. El metodo resulto ser sencillo, rapido y especifico para estudiar la curva de crecimiento de ambas cepas.
Influence of state oxidation of cobalt ion in the stability electrodes modified with monolayers SAM-TOA-ANTA-Con+-HRP-NHis
(Universidad de Los Andes, 2008) Pedro Romero; José M. Abad; Lenys Fernández; Olga M. Belandria; Vı́ctor M. Fernández
Influence of state oxidation of cobalt ion in the stability electrodes modified with monolayers SAM-TOAANTA-Con+-HRP-NHis.Quartz Crystal Microbalance (QCM) was used to investigate the adsorption of the HRP-NHis enzyme (horseradish peroxidase), which was modified by the addition of a tail of six histidine on its extreme Nterminal.The QCM operating at flow of 0.025 mL min-1 on a crystal whose gold electrode was modified with monolayers of SAM-TOA-ANTA-Co2+ and SAM-TOA-ANTA-Co3+. The oxidize form was obtained from the electrochemical oxidation of a monolayer of SAM-TOA-ANTA-Co2+. The results suggest that the HRP-NHis is attached to both monolayers in a similar way; on the contrary, the desortion of the attached protein is dramatically different. Thus, whereas the ligand-Co2+ bonds are reversible, which allows that the anchored protein is easily replacedby imidazol molecules. The 3+ oxidation state of the metal does not allow the interchange of protein by the imidazol molecules.
Método por Espectrofotometría de absorción molecular visible para la determinación de yoduro en muestras de orina
(2015) Pedro Romero; Mary Limachi Flores; Ana M. Bello; Olga M. Belandria
Se realizaron determinaciones de yoduro en muestras de orina matinal de individuos (34 mujeres y 26 hombres) de entre 19 a 26 anos, pertenecientes a una poblacion de estudiantes de la Universidad de Los Andes (Merida-Venezuela). Las determinaciones de yoduro se realizaron utilizando Espectrofotometria de Absorcion Molecular Visible a longitudes de onda de 450 nm con o- fenilendiamina (OPD) y 650 nm con bencidina como cromogenos a diferentes concentraciones de yoduro y a diferentes tiempos de reaccion (lectura), siendo seleccionado el OPD y un tiempo de 1 minuto, por ofrecer mejor respuesta en el espectro de absorcion. La metodologia utilizada para la cuantificacion de los niveles de yoduro en orina se baso en la preparacion de curvas de calibracion mediante la obtencion de medidas de absorbancia en funcion de la concentracion de yoduro en muestras patrones. Por interpolacion en estas curvas, se pudo obtener la concentracion de yoduro para cada muestra de orina analizada. Los resultados obtenidos indican que es posible medir concentraciones de yoduro en valores clinicamente normales (0,5-1,5 µg/mL) siendo el metodo utilizado de una alta confiabilidad. Para avalar los resultados obtenidos, se determinaron algunos parametros estadisticos entre los que podemos mencionar limite de deteccion (LOD) 0,000034 µg/mL, limite de cuantificacion (LOQ) 0,00011 µg/mL, coeficiente de variacion (CV) 1,20%, desviacion estandar (DS) 0,000002036, coeficiente de correlacion (r) 0,99708 y coeficiente de determinacion (r2) 0,99917 µg/mL.
Modificación de superficies de oro con tiourea como herramienta para la inmovilización y detección de vitamina K 3
(2018) Pedro Romero; Jeling Sánchez; J D Pedro Navarro; Emily Pacheco; Olga M. Belandria
Immobilizing molecules of vitamin K3 was performed by modification of gold surfaces by chemisorption of thiourea, to form self-assembled monolayers of thiols uniformly oriented. Gold over other materials presents the advantage of not having a stable oxide, allowing handle under atmospheric conditions, this makes this metal is one of the materials mostly used in the modification with self-assembled monolayers of thiols. Thus, after immersing the clean gold surface in a solution of 5mM thiourea and vitamin K3 100mM thiourea packed monolayer (Au/SAM/TOU-Vit.K3) and immobilized simultaneously vitamin K3 is obtained. The immobilization of vitamin K3 was not achieved by modifying the gold surface with 5mM thiourea and subsequent incubation in vitamin K3. To check if the formation of monolayers occurs, cyclical voltammetries were made in 0.5M KOH under N2 (with modified electrodes), in the window of potential between -0.2V to -1.2V vs Ag/AgCl, where a wave is shown next to -0.9V characteristic of sulfur compounds adsorbed on gold. For detection of vitamin K3 cyclic voltammetries in 0.1M KCl and potential window from -0.2V they were performed to -0.8V, resulting signals corresponding to vitamin K3 (Epc?-0.45V and Epa?-0.35V). Conditions of pH, concentration of vitamin K3, incubation times thiourea and vitamin K3, and the detection limit for cyclic voltammetry (50mM) was also optimized.
OPTIMIZACIÓN Y VALIDACIÓN DE UN MÉTODO POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR ULTRAVIOLETA PARA LA DETERMINACIÓN DE VITAMINA D3 EN SUPLEMENTOS DE CALCIO
(2013) Pedro Romero; Evelia Arévalo; Mayra Contreras; Norma Triana; Olga M. Belandria; Daniela Lisi
A "Micro to nano" dewetting strategy is presented to generate multi-direction-controlled, precise-positioning 1D assemblies of conductive silver (Ag) NPs based on a superhydrophobicity-directed assembly strategy. Electrons can transport along linear NP assemblies and their behavior is sustained by coating a coaxial protecting layer outside the nanostructures. This new concept might open new routes for NP-based nanoelectronic circuit fabrication.