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Determinación genética molecular de la predisposición a padecer cáncer colorrectal mediante la reacción en cadena de la polimerasa en sus variantes: tiempo real y con transcripción reversa.
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2017) Quispe Aruhuito, Richard
El cáncer colorrectal (CCR) es una enfermedad que cobra muchas vidas en el mundo, es originado por un trastorno genómico, adquirido o heredado, que da lugar a una multiplicación anárquica e incontrolada de las células. Actualmente existen diferentes pruebas que permiten diagnosticar y hacer seguimiento de la enfermedad, entre estos destacan las pruebas moleculares, a través de las cuales se puede identificar, por ejemplo, la presencia de citoqueratina 20 (CK-20) en sangre periférica como un marcador útil para diagnóstico y determinación de metástasis; por otro lado, a través del estudio de mutaciones en los genes de reparación, con previo análisis de inestabilidad microsatelital, se puede establecer si una persona tiene predisposición al desarrollo de cáncer de colon hereditario como es el síndrome de Lynch. Esta investigación se bazó en el uso de técnicas genéticas y moleculares que sirvieron para establecer la predisposición genética a la enfermedad, con este fin se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa para determinar CK-20 en sangre y la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) con el agente intercalante Sybr Green para determinar inestabilidad microsatelital a través del marcador Bat 25. El 20% de los pacientes estudiados resultó positivo para CK-20, la mayoría de los cuales fueron diagnosticados con enfermedad inflamatoria del intestino (EII), concluyendo que la CK-20 puede ser utilizada como un marcador coadyuvante en el seguimiento de CCR y como un marcador de EII en pacientes con riesgo de desarrollar CCR. Mediante la qPCR se identificó una temperatura melting distinta en 3 de los 200 pacientes estudiados, estos pacientes cumplen parcialmente con los criterios de Amsterdam lo que ayuda a establecer el síndrome de Lynch; sin embargo la confirmación del diagnóstico requiere de un análisis de fragmentos y secuenciación. Por último se estableció que uno de los factores de riesgo que más predispone al desarrollo de la enfermedad es el hábito a consumir tabaco.
Presencia de micronúcleos en células exfoliadas de la mucosa oral en personas expuestas a agentes genotóxicos
(Rev.Cs.Farm. y Bioq., 2016) Taborga Manrique, Ximena; Quispe Aruhuito, Richard; Larrea Poma, Monica M; Farfán Ochoa, Patricia; Revollo Zepita, Susana
Los micronúcleos son utilizados como biomarcadores para determinar daño en el ADN. Este daño es causado por agentes genotóxicos y puede ser el origen de mutaciones o cáncer. Con el propósito de determinar el riesgo genotóxico debido al trabajo y hábitos nocivos (tabaco y alcohol), se analizaron muestras de 60 personas. Se colectaron células de la mucosa oral, se tiñeron y contaron micronúcleos en el microscopio. Las personas que participaron como voluntarios en este trabajo son varones y mujeres comprendidos entre 21 y 68 años que trabajan en curtiembres, laboratorios, oncología, radiología, en imprentas o que tienen hábitos nocivos. En todos los grupos se encontró micronúcleos, sin embargo, las personas que tiene hábitos dañinos y están expuestas a algunos otros factores de riesgo fueron las que tuvieron más cantidad de células afectadas. Por otro lado, se encontró un mayor porcentaje de micronúcleos en mujeres y en personas mayores. Por tanto, se concluye que todas las actividades laborales mencionadas y los hábitos nocivos representan un riesgo para la integridad del genoma.