Browsing by Autor "Salamanca Capusiri, Efraín"

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Aplicación del método bioquímico-colorimétrico para identificar agentes trypanocidas
(Rev.Cs.Farm. y Bioq, 2019) Palma Tovar, Camila Isabel; Salamanca Capusiri, Efraín; Ticona Huallpara, Juan Carlos; Udaeta Velásquez, Enrique; Mita Díaz, Veronica; Vela Ramirez, Catherine Elena; Alacama Condori, Wara; Serrato, Alcides; Tito Avirari, Demetrio; Ybaguari Cartagena, Lucio; Ybaguari Quenevo, María; Amaturi Queveno, Dolores; Navi Queteguary, Victoria; Giménez Turba, Alberto
La tripanosomiasis americana es una enfermedad infecciosa desatendida, causada por el parásito protozoo Trypanosoma cruzi, que no cuenta con tratamiento en la fase crónica de esta enfermedad mortal, uno de los desafíos es encontrar terapias efectivas para esta compleja enfermedad, dado que no presenta síntomas asociables a la parasitosis por lo que es desconocida entre los médicos tradicionales. Nuestra Facultad está evaluando la medicina tradicional tacana como fuente de agentes antiparasitarios potenciales. El objetivo de este trabajo fue identificar productos naturales trypanocidas utilizando el método colorimétrico XTT-PMS. Para ello, se realizaron curvas de crecimiento de epimastigotes de T. cruziy determinamos el tiempo óptimo de realización de los ensayos. Se seleccionó la población inicial de trabajo (3x10(6)parásitos/mL), las condiciones de incubación (medio LIT, 27°C, 72 horas) y revelado (XTT-PMS, 4 horas). Con el protocolo optimizado, se realizaron evaluaciones de actividad de drogas control, controles naturales y 20 extractos crudos de plantas medicinales de la amazonía. La actividad se basó en cálculos de concentración inhibitoria media y se consideraron activos las sustancias con CI50< 50 μg/mL. De los 20 extractos evaluados, el 40% fueron activos. Las plantas más interesantes fueron Sipu sipu (CI50= 8.9 ± 1.7 μg/mL), Ejije bid'u (CI50= 9.1 ± 1.5 μg/mL) e Id'ene eid-hue (CI50= 10.8 ± 1.1 μg/mL) con valores de CI50 cercanos a los controles, confirmando la utilidad y potencial del protocolo desarrollado.
Caracterización química y biológica de los productos derivados de la biotransformación del alcaloide leishmanicida 2-fenilquinolina (2FQ) por Aspergillus spp.
(Rev. Bol. Quim, 2016) Parra Lizarazu, Carla; Quiroga Selaez, Gabriela; Salamanca Capusiri, Efraín; Flores Quisbert, Esther; Giménez Turba, Alberto
Los microorganismos, como los hongos filamentosos han sido utilizados ampliamente en estudios de biotransformación de fármacos y moléculas complejas provenientes de plantas. El alcaloide 2-fenilquinolina obtenido de la planta medicinal Galipea longiñora, fue el sustrato en procesos de biotransformación por la cepa 114QD, identificada como Aspergillus spp. La caracterización química fue realizada por cromatografía en capa fina (CCF), cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y cromatografía de gases (CG). Estas técnicas permitieron detectar la formación de un producto de biotransformación, el cual tiene como característica una mayor polaridad con un espectro de absorción UV diferente al del sustrato original. Dicho producto presenta un desplazamiento batocrómico de las bandas de absorción por sustitución por OH, un análisis (HPLC y GC) acoplado a espectroscopia de masas identificó de manera inequívoca la hidroxilación del anillo quinolínico al mostrar en su espectro de masas un ion molecular con el pico a m/z 221 comparado con m/z 205 de la 2-fenilquinolina. Las técnicas cromatográficas permitieron además determinar que luego de 360 horas de incubación en Medio Basal para hongos, aproximadamente un 78% de sustrato fue biotransformado. El análisis de las áreas en el tiempo para el producto formado mostró su aumento de hasta 10 veces más al hallado durante las primeras horas de cultivo. La actividad biológica frente a promastigotes de Leishmania evaluada por el método XTT, mostró valores de IC 50 diferentes a los del sustrato original.
Chemical study of seedlings of Galipea Longiflora (Evanta); A bio-guided approach
(Rev. Bol. Quim, 2016) Quiroga Selez, Gabriela; Parra Lizarazu*, Carla; Salamanca Capusiri, Efraín; Flores Quisbert, Esther; Giménez Turba, Alberto
Spanish title: Estudio químico biodirigido de plantines de Galipea longiñora (Evanta). Los principios activos (alcaloides quinolinicos) de Galipea longiñora (Evanta) fueron aislados y caracterizados. Estos alcaloides mostraron baja toxicidad y una buena actividad in vitro frente a cepas de Leishmania. Se han realizado estudios sobre plantines de diferentes edades de Galipea longiñora. El trabajo se centró en el análisis de variaciones de la mezcla de los alcaloides quinolinicos presentes en los extractos de plantines y la variación de la actividad antiparasitaria; comparados entre sí y con alcaloides totales de corteza de especímenes adultos. Se identificaron 5 alcaloides mayoritarios comunes en el árbol en edad adulta y plantines. En los plantines se identificaron hasta 14 alcaloides, llegando a reportarse compuestos como la: Shikimanina, y 2-(metoxifeniletilquinolina) cuando los plantines representan mayor edad. En general, los PAT, presentan mejor actividad biológica con una IC50 de 13,4±1,2<img border=0 width=8 height=10 src="../img/a01_figura07.gif">g/mL sobre L. amazonensis y 7,2±0.55<img border=0 width=8 height=10 src="../img/a01_figura07.gif">g/mL sobre L. braziliensis que el CAT. Esta comparación entre la variación de la actividad antiparasitaria frente a la variación del tamaño del plantin y a la composición química de los PAT, nos da una pauta de cuáles serían las moléculas que influyen en la actividad biológica.
Método fluorométrico para identificar agentes naturales citotóxicos y su aplicación en la evaluación de agentes antiparasitarios selectivos
(Rev.Cs.Farm. y Bioq, 2019) Palma Tovar, Camila Isabel; Salamanca Capusiri, Efraín; Ticona Huallpara, Juan Carlos; Udaeta Velásquez, Enrique; Mita Díaz, Veronica; Vela Ramirez, Catherine Elena; Alacama Condori, Wara6; Ibaguari, Lucio; Ibaguari, María; Navi, Victoria; Tito Avirari, Demetrio; Serrato, Alsides; Marupa, Natalio; Chao, Benigno; Giménez Turba, Alberto
El ministerio de salud tiene como una de las prioridades en investigación a las enfermedades infecciosas, entre las que incluye a las leishmaniasis y la tripanosomiasis americana. En la Facultad Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas se estudian especies vegetales medicinales utilizadas por la cultura Tacana como fuente de agentes antiparasitarios potenciales. Los laboratorios dedicados al descubrimiento de moléculas naturales con actividad antiparasitaria, tienen el desafío de desarrollar protocolos que permitan detectar biomoléculas selectivas, efectivas y menos tóxicas que las disponibles. Por ende, las evaluaciones antiparasitarias in vitro (CI50), deberían ir acompañadas de evaluaciones de citotoxicidad (DL50), con el fin de calcular un Índice de Selectividad (IS=DL50 / Cl50 como parámetro de especificidad biológica. La citotoxicidad fue medida sobre líneas de macrófagos (RAW 264.7, murino), células involucradas en las infecciones por parásitos intracelulares. El protocolo fluorométrico parte con una población de 5x10(4) células/ mL, incubada a 37°C en DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's médium), por 96 horas, con adición de resazurina (2mM) 3 horas antes de las lecturas finales. Bajo estas condiciones se evaluó la citotoxicidad de drogas control y 15 extractos vegetales seleccionados por su actividad anti-kinetoplastida. El extracto de Cosmailu fue el más citotóxi-co, Ejije bid'u resultó selectivo para T. cruzi y Leishmania amazonensis, mientras que Id'ene eidhue, fue selectivo para L. amazonensis. Finalmente, los otros 12 extractos resultaron ser poco selectivos o citotóxicos.