Browsing by Autor "Silvestre, Julio"

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DNA-UMSAgen, EXTRACCIÓN DE DNA GENÓMICO PARA DIAGNÓSTICO MOLECULAR: MÉTODO RÁPIDO Y ECONÓMICO
(Cuad. - Hosp. Clín., 2006) Amaru, Ricardo; Miguez, Hortencia; Peñaloza, Rosario; Torres, Gina; Silvestre, Julio; Cuevas, Heriberto
INTRODUCCIÓN El estudio del ácido desoxirribunocleíco (DNA) es imprescindible para la medicina moderna; por ello, se ha diseñado diferentes técnicas para su extracción, cuyos costos son altos y de tiempo prolongado. En este trabajo se describe un método modificado de extracción de DNA (DNA-UMSAgen) basado en la técnica de Miller. MÉTODOS Las células mononucleares fueron obtenidas de sangre venosa periférica de un sujeto voluntario, para realizar 40 extracciones de DNA; 20 con el método modificado DNA-UMSAgen y otros 20 con el método clásico. Posteriormente se evaluó la concentración, calidad y utilidad de estos DNA extraídos. RESULTADOS La pureza del DNA extraído por el método DNA-UMSAgen es de 1,88 similar al de la técnica clásica 1,91, las concentraciones obtenidas son 20,4 ug/106 cel y 56ug/106 cel respectivamente. La evaluación por electroforesis en agarosa y la amplificación del exon 12 del gen JAK2 por PCR fue satisfactoria. CONCLUSIÓN El método DNA-UMSAgen es una alternativa de extracción de DNA genómico, rápido y económico, adecuado para países en vías de desarrollo.
Primera experiencia en aislamiento de células endoteliales humanas en Bolivia
(Cuad. - Hosp. Clín., 2005) Amaru, Ricardo; Silvestre, Julio; Torres, Gina; Miguez, Hortensia; Peñaloza, Rosario; Araoz, Rubén; Cuevas, Heriberto
Introducción Las células endoteliales pueden proveer información valiosa con respecto a muchos procesos patológicos como la aterosclerosis, inflamación, neoplasia y angiogénesis. Este trabajo describe la primera experiencia boliviana en el aislamiento y cultivo de células endoteliales humanas derivadas de la vena umbilical (HUVEC). Métodos Un segmento largo de cordón umbilical se utilizó para el aislamiento y fue tratado por digestión con colagenasa. Las células endoteliales fueron desprendidas de la íntima y posteriormente cultivadas en medio de cultivo M199 y suero fetal bovino. Técnicas morfológicas, inmunohistoquímicas y de citometría de flujo fueron utilizadas para identificar estas células. Resultados Se examinaron las células endoteliales obtenidas por análisis morfológico e inmunohistoquímico. El marcaje con CD34 fue positivo para más del 90% de las células obtenidas por digestión con colagenasa analizado por citometría de flujo. Conclusión Se logró aislar y cultivar HUVEC de manera exitosa. Una gran variedad de experimentos y aplicaciones en ciencias biomédicas pueden ser potencialmente factibles.