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Análisis de la asociación del polimorfismo del gen pnpla3 como factor de riesgo genético de susceptibilidad a la enfermedad hepática esteatósica asociada a disfunción metabólica en población mixta del departamento de La Paz
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2025) Campos Chávez, Gabriela Karen Marcela; Sosa Tordoya, Luis Fernando
La enfermedad hepática esteatósica asociada a disfunción metabólica (MASLD) es actualmente la principal causa de enfermedad hepática crónica a nivel mundial y se proyecta como la principal indicación para trasplante de hígado en 2030. El polimorfismo del gen PNPLA3 ha sido identificado como un factor genético clave en su desarrollo. Además de incrementar la susceptibilidad a progresar hacia formas graves de la enfermedad, como cirrosis o carcinoma hepatocelular. El objetivo de este estudio fue determinar la asociación entre polimorfismo +10109 C>G del gen PNPLA3 con la susceptibilidad a MASLD en población mixta del departamento de La Paz Bolivia. Para dicho efecto: Se realizó un proceso de recolección, tratamiento y análisis de muestras de sangre de pacientes con MASLD y controles sin la enfermedad. El polimorfismo del gen PNPLA3 se analizó mediante PCR-RFLP y digestión enzimática con la enzima Hin1-II. Así mismo, se evaluaron variables antropométricas, condiciones clínicas y marcadores bioquímicos relacionados a MASLD. La frecuencia genotípica en la muestra estudiada, fue de 1.11% para C>C, 34.4% para C>G y 64.4% para G>G. El alelo C se presentó en un 16.6% (OR=0.84, IC 95% 0.37-1.91), lo que sugiere una posible tendencia a ser un factor protector. Por otro lado, el alelo G estuvo presente en el 83.3% (OR=1.19, IC 95% 0.52-2.68). Además, en los pacientes del grupo casos, se observó una alta prevalencia de obesidad, alteración de los valores normales en marcadores bioquímicos para afección hepática, presencia de comorbilidades como la hipertensión arterial y diabetes mellitus tipo 2 que agravan el desarrollo de la enfermedad. No se encontró una asociación significativa entre el polimorfismo +10109 C>G del gen PNPLA3 y predisposición a MASLD en los pacientes en estudio. Si bien los resultados obtenidos no fueron estadísticamente significativos, el alelo G mostró una tendencia a ser un posible factor de riesgo, mientras que el alelo C podría actuar como factor protector en quien lo porte.
Evaluación de los cambios en los niveles de Citocinas inducidos por el tratamiento con gel de aloe vera obtenido de la comunidad de Cahuayuma combinado con fármacos anticancerígenos en modelo Murino
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2019) Apaza Mamani, Jhony Víctor; Sosa Tordoya, Luis Fernando
El cáncer es una de las enfermedades con la mayor tasa de mortalidad a nivel mundial y debido a su complejidad, la terapia utilizada como la quimioterapia, radioterapia en la mayoría de los casos no son insuficientes para controlar o curar la enfermedad, ocasionando en muchos casos efectos tóxicos en el paciente, sin tomar en cuenta los efectos secundarios que conllevan estos tratamientos. Este hecho ha motivado la investigación y el empleo de productos naturales, ya sea como alternativa terapéutica para esta enfermedad o como complemento. Producto de diferentes trabajos de investigación, el gel de Aloe vera ha sido propuesto como alternativa terapéutica en diferentes enfermedades entre ellas el cáncer. En particular se ha atribuido a los componentes que forman parte del gel de Aloe vera, propiedades inmunológicas anticancerígenas. Debido a que la composición de metabolitos secundarios de las plantas varía en función a la región geográfica y condiciones medioambientales en las que crece, es importante evaluar si el gel de Aloe vera obtenido de la comunidad de Cahuayuma del departamento de La Paz tiene el efecto inmunomodulador esperado. OBJETIVO. Evaluar los cambios en los niveles de citocinas producidas por células murinas mononucleares de sangre periférica y tejido de pulmón, inducido a cáncer con benzopireno y tratadas con gel de Aloe vera obtenido de la comunidad de Cahuayuma, ya sea solo o en combinación con el fármaco anticancerígeno cisplatino. METODOLOGÍA. Se conformaron 4 grupo de ratones inducidos a cáncer de tejido de pulmón por Benzopireno, el primer grupo fue el grupo control, ratones que no recibieron ningún tipo de tratamiento, el segundo grupo, ratones tratados con gel de Aloe vera 100 µL (88 mg/Kg), el tercer grupo, ratones tratados con cisplatino 2 mg/Kg y el cuarto grupo, ratones con ambos tratamientos con las dosis antes descritas. Se aisló el ARN a partir de células sanguíneas y tejido de pulmón para evaluar los cambios en la expresión génica de las citocinas, se cuantifico su expresión genética con PCR en tiempo real empleando el método de ΔΔCt y evidenciar la expresión y represión de los genes de las citocinas IL-4, IL-10, IFN-γ y TNF-α. RESULTADOS. En células sanguíneas se logró evidenciar que el tratamiento con gel de Aloe vera, favorece la expresión de los genes de la IL-10, IFN-γ, TNF-α y reprime a la IL-4, el tratamiento con cisplatino, induce la expresión de la IL-10, y reprime a la IL-4, IFN-γ y TNF-α y el tratamiento combinado, estimula la expresión de IL-10 y IFN-γ y al mismo tiempo reprime la expresión de IL-4, TNF-α. En tejido de pulmón de ratón se observó que el tratamiento con gel de Aloe vera favorece la expresión de IFN-γ y reprime la expresión de IL-4, TNF-α, el tratamiento con cisplatino induce expresión de IL-4, IFN-γ, TNF-α y el tratamiento combinado estimula la expresión de IFN-γ y reprime la expresión de IL-4, TNF-α. CONCLUSIÓN. Los cambios en la expresión de genes de las citocinas en células de sangre periférica y en tejido de pulmón muestran que el tratamiento con gel de Aloe vera favorece la expresión de las citocinas relacionadas con la respuesta de tipo Th1 y el tratamiento combinado de gel de Aloe vera/cisplatino si bien favorece la respuesta de tipo Th1 disminuye los niveles de expresión de citocinas Th1 alcanzados cuando ambos compuestos estudiados se administran de manera independiente.
Evaluación del comportamiento de β2microglobulina y semaforina3A en lupus eritematoso sistémico como biomarcadores de actividad de la enfermedad y nefritis lupica mediante el análisis de la expresión génica por RT-qPCR en orina
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2023) Cortez Velarde, Jacqueline Andrea; Sosa Tordoya, Luis Fernando
Objetivo: Evaluar el comportamiento de β2Microglobulina (β2M) y Semaforina3A (Sema3A) en lupus eritematoso sistémico como biomarcadores de actividad de la enfermedad y nefritis lúpica mediante el análisis de la expresión génica por RT-qPCR en orina. Métodos: Se utilizó RT-qPCR para cuantificar la expresión relativa de ARNm por el método 2-ΔΔCt de β2M y Sema3A en la orina de 81 pacientes de sexo femenino, 44 con diagnóstico de LES y 37 voluntarios sanos como controles. Los pacientes fueron categorizados según la actividad de la enfermedad y la presencia o ausencia de nefritis lúpica. En todos los pacientes se evaluaron biomarcadores potenciales mediante ELISA. El análisis de comparación se realizó utilizando la prueba de la t de Student o la prueba de la U de Mann Whitney. La capacidad de los biomarcadores para discriminar entre dos grupos de pacientes fue hecho mediante el análisis de la Curva ROC y el AUC. Resultados: En pacientes con LES se observó una expresión urinaria elevada del gen β2M (2.4 veces mayor) y del gen Sema3A (9.1 veces mayor únicamente en el 25% de pacientes con expresión detectable) en comparación con voluntarios sanos. No se encontraron diferencias significativas en los niveles de expresión de β2M y Sema3A en el análisis comparativo de los grupos de LES activo e inactivo ni entre los grupos de LES con y sin afectación renal (valor p> 0,05 en todos los casos). Los valores del AUC para β2M y Sema3A fueron de 0.750 y 0,536 respectivamente en el contexto de actividad, y de 0.708 y 0.667 respectivamente, en relación con la afectación renal, indicando cierta capacidad para distinguir entre grupos, pero sin alta precisión (valor p> 0,05 en todos los casos). Conclusiones: Estos hallazgos sugieren, limitada utilidad de β2M y Sema3A como biomarcadores precisos para la actividad del LES o la presencia de NL en estos pacientes.