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Búsqueda de actividad antiinflamatoria en plantas amazónicas con actividad antiviral: estudios in-vitro de las hojas de Mangifera indica L. y corteza de Tipuani tipu ( Benth) Kuntze
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2021) Cadena Vargas, Cinthya Ximena; Terrazas Aranda, Kattya
El estudio de plantas con potencial actividad antiviral ha permitido identificar en los recursos de la Medicina Tradicional amazónica de la Comunidad Tacana a varias especies con actividad contra el Virus del herpes simple tipo 2 (HSV-2) y modificar las respuestas anti-virales, entre estas a Copaifera reticulate Ducke, Equisetum giganteum L, Croton leccheri Mûll. Arg., Uncaria tormentosa wild ex Schult., y últimamente a Mangifera indica L. y Tipuana tipu (Benth) Kuntze, conocidos comúnmente como mango y tipa, respectivamente. Sin embargo, la medicina tradicional Tacana, utiliza estas especies en el manejo de dolencias relacionadas con otras cuantas fisiopatologías como la infección bacteriana y la inflamación. Bajo este antecedente, en este trabajo se planteó explicar posibles efectos de estas dos especies sobre la producción de cito quinas que regulan la inflamación. En este marco antes de examinar sus actividades biológicas fue necesario establecer el alcance de sus potenciales efectos deletéreos, efectuando ensayos que recomiendan guías internacionales elaboradas para tal fin, por lo que en el presente trabajo se procedió a evaluar la inocuidad/toxicidad de los extractos hidro-alcohólicos de hojas de Mango (EHM) y corteza de Tipa (ECT), provenientes del norte amazónico de La Paz, y después de explorar la capacidad de inducir sobre células mono nucleares de sangre periférica (CMSP) humana, la liberación de cito quinas como expresión de actividad anti-inflamatoria. Los extractos fueron adicionados en concentraciones crecientes a las CMSP (2.5x106 células/mL) por diferentes tiempos de cultivo a 37°C, 5% CO2 y saturación de humedad. Se evaluaron tres parámentos de toxicidad celular: a) El efecto sobre la membrana celular, por el ensayo de exclusión del colorante azul tripan; b) la determinación de lisis celular, midiendo la actividad de lactato deshidrogenasa liberada por las células dañadas, por ensayos colorimétricos y c) el efecto sobre la actividad funcional celular, con ensayo de medición de la capacidad para reducir el Bromuro-de-tiazolil-azul-tetrazolio (MTT). La evaluación de una potencial actividad anti-inflamatoria de los extractos vegetales fue determinada por ELISA para la medición de interleucinas (TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10), en los sobrenadantes de células en las que se indujo como modelo biológico de inflamación in-vitro la inducción de su liberación por LPS en cultivo. Los resultados mostraron un efecto tóxico de los extractos sólo a concentraciones iguales o mayores a 1000 µg/mL; hecho que determinó que se prosiga con los estudios de actividad biológica a concentraciones de 1 a 100 µg/mL. El EHM tiene propiedades anti inflamatorias al inhibir la síntesis/liberación de TNFα e IL1β, e inducir la síntesis de IL-10, en concentraciones inocuas para las células. Contrariamente, el ECT muestra tener efectos estimuladores sobre el TNFα; sin embargo, también inhibe la síntesis/liberación de IL-1β, además de un incremento no muy marcado de IL-10, lo cual aparentemente podría estar en relación con una actividad moduladora de la inmunidad contra las infecciones, más que una actividad netamente antiinflamatoria.
Efecto inmunomodulador de los extractos hidroalcoholicos de Erytroxylum coca Lam, equisetum giganteum L., Croton lechleri Muell Arg. : Estudio en la viabilidad y funcionalidad de leucocitos humanos
(Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, 2022) Padilla Lizarazu, Ximena; Terrazas Aranda, Kattya
En Bolivia gran parte de la población usa plantas medicinales para tratar o prevenir enfermedades, por lo que es importante conocer especialmente sus efectos. La finalidad del presente trabajo es la de evaluar el efecto inmunomodulador in vitro de los extractos hidro-alcohólicos de Erytroxylum coca Lam, Equisetum giganteum L. y Croton lechleri Muell. Arg, sobre células polimorfonucleares y mononucleares de voluntarios humanos sanos. Los resultados encontrados muestran que, a dosis de consumo humano (en el caso de Erytroxylum coca Lam equivalente al consumo de harina de coca indicado por la medicina tradicional) y de actividad antiviral( por estudios previos con uso de dosis de 10ug y 30ug para Croton lechleri Muell. Arg, y equisetum Giganteum L.), no afectan la viabilidad de los leucocitos in vitro, la que se mantiene de 90 a 100 %. Erytroxylum coca Lam estimula en un 16% más, respecto a los controles, la actividad de óxido-reductasas mitocondriales, en cambio, con Equisetum giganteum L y Croton lechleri Muell. Arq no se vio afectado el funcionamiento mitocondrial. La capacidad fagocítica de levaduras y la quimiotaxis celular no mostraron modificaciones, con ninguno de los extractos. La capacidad para eliminar bacterias fagocitadas, tampoco se modificó. E. giganteum L. mostró actividad pro-inflamatoria porque generó la estimulación de IL-1B e IL-6 liberación de TNF-a, inhibición de INF-y por lo que aparentemente tendría efecto modulador de la respuesta Th1. Croton lechley Muell. Arg. mostró estimulación de la producción de IL-1B, IL-6, TNF-a e inhibió INF- y e IL-10 Por su parte, E. coca Lam no mostró actividad pro-inflamatoria por IL-1B e IL-6, sin embargo, mostró esta actividad por inhibición de IL-10, y liberación de TNF-a. Se constituye que, E. giganteum L, Croton. lechlery Muell.A, y E. coca Lam, mostraron actividad pro-inflamatoria dependiente de una respuesta Th 1, compatible con un efecto favorecedor de la protección contra ciertas enfermedades a través del control de agentes infecciosos principalmente virus y parásitos intracelulares.