Validación de un método analítico para la determinación de clorofila-A en muestras naturales de agua por espectroscopía UV-VIS

Abstract

En el presente trabajo se realizó la validación de un método para la determinación espectrofotométrica de clorofila-a (Magnesium[methyl(3S,4S,21R)-14-ethyl-4,8,13,18-tetramethyl-20-oxo-3-(3-oxo-3-{[(2E,7R,11R)-3,7,11,15-tetramethyl-2-hexadecen-1-yl]oxy}propyl)-9-vinyl-21-phorbinecarboxylatato(2−)-κ2N,N′]), en muestras naturales de agua, trabajo perteneciente al proyecto “Accurate measurements of Dissolved Oxygen, Phosphorus and Chlorophyll in several aquatic environments for the correct assessment of Biodiversity Monitoring” con el apoyo PTB (Physikalisch-Technische Bundesanstalt) y la participación de diferentes Institutos de Metrología. La clorofila-a está presente en las comunidades fitoplanctónicas entre ellos diversos grupos de protistas, denominados algas, provenientes de cuerpos de agua. El principio de determinación se basa en la absorción molecular de la clorofila-a en solución extraída y acidificada en solución etanólica a 665 y 750 nm. El método fue validado y cumple con todos los requerimientos de control y aseguramiento de calidad por la norma ISO/IEC 17025:2018 y recomendado y establecido por la norma ISO 10260:1992. El método es sensible, con respuestas lineales hasta 1000 Chl-a (g/L) y un rango de trabajo de 5 a 1000 Chl-a (g/L), con un r2= 0,9999972 y límites de detección y cuantificación de 0,3419 y 1,0361 Chl-a (g/L) respectivamente, lo cual hace posible su cuantificación en muestras con presencia de comunidades planctónicas, en especial para aguas mesotróficas, eutróficas e hipertróficas. Se verificó la precisión, selectividad y robustez del método analítico, determinando el contenido en muestras naturales de agua con presencia significativa de fitoplancton, en todos los casos, se encontraron porcentajes de recuperación de 99,9-101,1%.