CARACTERIZAÇÃO DA SUBPOPULAÇÃO DE CÉLULAS-TRONCO PLURIPOTENTES NO CANCER DE MAMA TRIPLO NEGATIVO EM MODELO TRIDIMENSIONAL IN VITRO

Abstract

O cncer de mama triplo negativo (TNBC) responsvel por 10-20% de todos os diagnsticos de cncer de mama em todo o mundo. considerado mais agressivo do que outras formas de tumores invasivos da mama devido ao seu fentipo ER-/PR-/HER2-, que oferece aos pacientes poucas alternativas de tratamento alm da quimioterapia e mau prognstico.As clulas-tronco do cncer (CSCs) so uma pequena subpopulao do Microambiente Tumoral (TME), envolvida na diferenciao, migrao, autorrenovao e proliferao.So resistentes quimioterapia e tendem a se expandir aps o tratamento, levando recorrncia, metstase e a um fentipo tumoral mais agressivo.O objetivo desse projeto compreender os mecanismos pelos quais as CSCs regulam processos biolgicos e causam quimiorresistncia por meio do cultivo das linhagens de cncer de mama triplonegativo MDA-MB-231, BT-549 e Hs 578T em cultura tridimensional para a formao de esferides tumorais enriquecidos com CSC, para anlise da expresso gnica de diferentes vias de sinalizao por qPCR, morfologia por Microscopia Confocal Laser e anlise de Vesculas Extracelulares (VEs) por Zetasizer.Expresso gnica por RT-qPCR com alvos relacionados pluripotncia e desenvolvimento tumoral foi realizado em esferoides de BT-549, MDA-MB231 e Hs 578T tratados com Doxorrubicina (DOX) e apontam que o tratamento quimioterpico base de doxorrubicina demonstra capacidade de aumentar a progresso tumoral in vitro, regulando positivamente genes relacionados proliferao celular e manuteno da pluripotncia.A anlise estrutural mostra a organizao ordenada das clulas, a tendncia das CSCs de se agrupar nas regies internas dos esferides e abundncia de vesculas intracelulares.Avaliao de vesculas presentes no sobrenadante dos esferoides de MDA-MB-231 controle e tratados com DOX indicam a liberao de quantidade significativamente superior de microvesculas em relao a exossomos pelas clulas tumorais, que podem atuar como meio de comunicao extracelular e modulao dentro do microambiente tumoral.Os resultados obtidos at o momento demonstram a extrema importncia das CSCs pluripotentes no controle e progresso do tumor, o que torna imprescindvel o entendimento dos mecanismos de sua atuao no microambiente tumoral para aprimoramento dos tratamentos j existentes e desenvolvimento de terapias alternativas para essa neoplasia.