CARACTERIZACIÓN DE CÉLULAS CEPILLO DEL CEREBELO TRATADAS POR EXPOSICION PROLONGADA DE LA MUESTRA AL ALCOHOL ISOPROPILICO EN VARIANTE DE IMPREGNACIÓN ARGENTICA

Abstract

Resumen Las celulas cepillo son neuronas glutamatergicas de la capa granular en la corteza cerebelosa que constan de 3 (tres) o mas subtipos, caracterizados por fenotipos quimicamente distintos, propiedades intrinsecas para formar sinapsis y patrones de descarga particulares. Dichas celulas no fueron identificadas por metodos de impregnacion argentica hasta 1994, cuando Mugnaini realiza su descripcion. En este trabajo presentamos una variante de impregnacion argentica, en el cual las muestras son sumergidas en alcohol isopropilico y luego sometidas a lavados con alcohol etilico proporcionando un proceso de rapida impregnacion que reduce la observacion de precipitados, y donde la cristalizacion se realiza de manera uniforme, lo que permite observar la integridad del cuerpo celular y sus procesos, aumentando tanto la fiabilidad de la tecnica como reproducibilidad de la tincion y facilita la toma de sus dimensiones. Tambien se destaca que el medio de montaje influye en la conservacion de la calidad temporal del preparado, con una mejora de la preservacion utilizando Permount vs Balsamo de Canada. Palabras clave: Celulas cepillo, tecnica de Golgi, alcohol isopropilico, alcohol etilico, balsamo de Canada, Permount. Summary Brush cells in the cerebellum are glutamatergic neurons of the granular layer. They are divided into three or more subtypes and were not identified by silver impregnation methods until 1994, when Mugnaini identified them using a variant of Golgi method. To make evident brush cells of the Wistar rat cerebellum, we developed a modification of the silver impregnation techniques. The improvement of method is due to the immersion of tissue sections in isopropyl alcohol following sequential washes with ethyl alcohol. It provide a quick impregnation, diminish precipitate outside cells, and the crystallization is more uniform. Morphological and morphometric studies of brush neurons stained with this technique are easy because the cell body and its processes are well observed. We also observed quality differences in the final preparation according with the mounting medium used. An improvement of the preservation was observed using Permount medium. Keywords : Brush cells, Golgi technique, isopropyl alcohol, ethyl alcohol, Canada balsam, Permount