Efecto de los extractos de alcaloides totales de evanta (EAE) sobre la expresión del gen interferón gamma en tejido murino inflamado mediante PCR en tiempo rea

Abstract

El presente trabajo cuantifico de manera relativa la expresión del gen Interferón Gamma (IFNy) in vivo en ratones de laboratorio sometidos al extracto de alcaloides totales (EAE) de Galipea longiflora (evanta) y al estimulante lipopolisacárido (LPS) de E. Coli. El extracto de evanta se ha utilizado experimentalmente como antiparasitario para combatir los efectos de la leishmaniosis cutánea en el marco del proyecto ASDI/UMSA Enfermedades Infecciosas del trópico boliviano. Para obtener datos cuantitativos relativos de la expresión del IFNy, que forma parte de la respuesta inmune en los murinos, se utilizaron dos sistemas semi-automatizados: 1) Maxwell 16 para la extracción de ARN total, 2) Real time PCR a partir del ARN purificado del gen IFNy y del gen de expresión constante B2-microglobulina como patrón de normalización proporcional. La normalización se empleó para ajustar los valores cuantitativos relativos de ADNc a una escala común de comparación. Los resultados obtenidos sustentan los resultados encontrados previamente, donde los EAE demostraron tener un efecto antiinflamatorio a nivel de la expresión del gen INFy. A su vez, demuestran que la combinación y optimización de técnicas automatizadas para el estudio de expresión génica de diferentes proteínas y moléculas a partir de tejido, permitirán el estudio de una gran variedad de moléculas de interés en los diferentes campos de la medicina.