Estandarización de la técnica para la obtención de trypomastigotes en células 3T3 a partir de una cepa local de epimastigotes de Tripanosoma cruzi

Abstract

Objetivo: evaluar el empleo de cultivos celulares para la obtencion de tripomastigotes en celulas 3T3, a partir de una cepa local de epimastigotes de Tripanosoma cruzi.Metodo: se realizo cultivo in vitro de celulas 3T3 en medio DMEM-SBF al 10% mas penicilina estreptomicina, a 37°C, 95% de humedad y 5% de CO2 al septimo dia, fueron infectados con epimastigotes de T. cruzi cepa TcV, aislados de pacientes con Chagas agudo y cultivados preliminarmente en medios bifasicos como NNN y LIT.Resultados: a los 14 dias de infeccion se observo al parasito en las formas: de amastigotes (forma intracelular), posteriormente la tripomastigote (forma extracelular) que fueron liberados al medio una vez lisadas las celulas infectadas. Posteriores sub cultivos de celulas 3T3 con trypomastigotes obtenidos a partir de los epimastigotes mejoran la obtencion de T. cruzi.Conclusiones: es posible la obtencion de trypomastigotes a partir de una cepa local de epimastigotes recreando el ciclo biologico del parasito in vitro.Palabras claves: cultivos celulares, epimastigotes, trypomastigotes, celulas 3T3, cepa de T. cruzi - TcV.